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主要内容 1微生物的遗传 2微生物的变异 3微生物基因重组 4菌种的衰退、复壮和保藏 引言(相关概念) 遗传(heredity 或 inheritance) 指生物的上一代将自己的一整套遗传因子传递给下一代的行为或功能,具有极其稳定的特性。 遗传型(genotype):又称基因型,指某一生物个体所含有的全部遗传因子,即基因的总和。 遗传型是一种内在的可能性或潜力,其实质是遗传物质上所负载的特定遗传信息。 表型(phenotype) 具有一定遗传型的个体,在特定的外界环境中,通过生长和发育所表现出来的种种形态和生理特征的总和,即为其表型; 即是遗传型在合适的环境下的具体表现。 遗传型+环境条件 表型 变异(variation) :指生物体在某种外因或内因的作用下所引起的遗传物质结构或数量的改变,亦即遗传型的改变。 变异的特点是在群体中以极低的几率出现,性状改变的幅度极大, 变化后的性状是稳定的、可遗传的。 微生物是遗传学研究中的明星 微生物细胞结构简单,营养体一般为单倍体,方便建立纯系。 很多常见微生物都易于人工培养,快速、大量生长繁殖。 对环境因素的作用敏感,易于获得各类突变株,操作性强。 第一节 微生物的遗传一、遗传变异的物质基础 1883-1889年间,Weissmann提出种质连续理论,认为遗传物质是一种具有特定分子结构的化合物; 20世纪初,发现了染色体并提出了基因学说,使得遗传物质基础的范围缩小到染色体上; 1944年后,由于连续利用微生物这一有利的实验对象进行了三个著名的实验,才以确凿的事实证实核酸,尤其是DNA才是遗传变异的真正物质基础。 经典转化实验、噬菌体感染实验、植物病毒重组实验 1、转化试验:肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae) 以肺炎链球菌作为研究对象,肺炎链球菌可以使人患肺炎,也可以使小白鼠患败血病而死亡; 有荚膜者是致病性的,它的菌落表面光滑(smooth),称为S型; 有的不形成荚膜,无致病性,菌落外观粗糙(rough),故称R型。 Griffith(格里菲斯)转化试验结果 (有毒)死细菌中的某种物质转移到(无毒)活细菌中,并使之具有毒性,导致小家鼠死亡; 他将这种细菌遗传类型的转变称为转化,并将引起转化的物质称为转化因子(tranforming principle); 当时的化学与生化分析技术还无法鉴定杀死细菌中的成分,因而不知转化因子为何物。 离体转化实验 1944年,O.T.Avery、C.M.Macleod和M.McCarty从热死的S型肺炎链球菌中提纯了可能作为转化因子的各种成分,并在离体条件下进行了转化实验。 离体转化实验结果 来源于加热杀死的SIII细菌,并使 RII细菌转化成为SIII型细菌的转化因子是DNA。 Avery等人的实验实际上表明:决定细菌遗传类型的物质是DNA,即证明了DNA就是遗传物质。 2、噬菌体感染实验 1952年,A.D.Hershey和M.Chase发表了证明噬菌体的遗传物质基础的著名实验-噬菌体感染实验。 首先,他们将E.coli培养在以放射性32P3O4或35S2O4作为磷源或硫源的合成培养基中。结果,可以获得含32P-DNA(噬菌体核心)的噬菌体或含35S-蛋白质(噬菌体外壳)的两种实验用噬菌体。 蛋白质外壳 在噬菌体的感染过程中,其蛋白质外壳未进入宿主细胞。 DNA核心 进入宿主细胞的DNA经增殖、装配后,能产生一大群既有DNA核心又有蛋白质外壳的完整噬菌体颗粒。 3、植物病毒的重组实验 H.Fraenkel-Conrat(1956)用含RNA的烟草花叶病毒(TMV)进行了著名的植物病毒重建实验。 把TMV和 HRV (霍氏车前花叶病毒)的蛋白质外壳与RNA相分离。 用TMV的RNA与HRV的蛋白质外壳, HRV的RNA与TMV的蛋白质外壳重建后的杂合病毒去感染烟草。 植物病毒的重组 三个经典试验结果 细胞生物的遗传物质是双链DNA; 病毒的遗传物质可以是单链的或双链的DNA或RNA, 即:ssDNA,dsDNA,ssRNA或dsRNA。 朊病毒的发现和思考 无论是DNA还是RNA作为遗传物质的基础已是无可辨驳的事实。但朊病毒的发现对“蛋白质不是遗传物质”的定论也带来一些疑云。PrP是具有传染性的蛋白质致病因子,迄今未发现蛋白内有核酸,但已知的传染性疾病的传播必须有核酸组成的遗传物质,才能感染宿主并在宿主体内自然繁殖。那么这是生命界的又一特例呢?还是因为目前人们的认识和技术所限而尚未揭示的生命之谜呢?还有待于生命科学家去认识和探索。 1 DNA复制 微生物基因表达的调控 阻遏蛋白也能与培养基中的底物(由结构基因转录、转译的酶催化分解的
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