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中药对双歧杆菌生长的影响 摘要:选用23种常用中药对双歧杆菌进行了体外生长促进实验,结果发现12.5%的黄芪、芦根、桠葫芦分别对双歧杆菌有明显的促进生长作用。同一中药不同浓度对双歧杆菌的增殖效果存在差异。 关键词:中药;双歧杆菌;影响 微生物研究。 中药是我国医学宝库的精髓,许多中药含有能够促进双 歧杆菌增殖的多糖类物质。作者选用了23种常用富含多糖 类中药对双歧杆菌进行了体外培养实验,从中筛选出了几种 对双歧杆菌生长有明显促进作用的中药,本文对此作一报道。 1 材料与方法 1.1 菌种:长双歧杆菌(Bifidobacterism longum),菌种编号 BM3,为本所第十一课题组分离、保存。 1.2 中药液制备 表1 不同中药对双歧杆菌生长的影响 中药*E1 *E2中药*E1 *E2 麦门冬-0.084 -0.230车前子-0.219 -0.228 五加皮-0.123 -0.161菟丝子-0.108 -0.113 黄 芪0.052 -0.023艹律 草-0.288 -0.268 芦 根0.023 -0.034茯 苓-0.096 -0.148 党 参-0.190 -0.198云 芝-0.023 -0.108 猪 苓-0.225 -0.212灵 芝-0.127 -0.179 白 芨-0.190 -0.244枸 杞-0.124 -0.240 玉 竹-0.175 -0.234莱菔子-0.249 -0.258 五味子-0.070 -0.107玄 参-0.223 -0.187 天门冬-0.041 -0.043桠葫芦0.011 -0.137 半 夏-0.083 -0.015败酱草-0.132 -0.179 石 斛-0.175 -0.264 注:*E1为中药浓度12.5%时的E值;*E2为中药浓度25%时的 E值。 1.2.1 中草药原料:麦门冬、五加皮、黄芪、芦根、党参、猪苓、白 芨、玉竹、五味子、天门冬、半夏、石斛、车前子、菟丝子、律草、 茯苓、云芝、灵芝、枸杞、莱菔子、玄参、桠葫芦、败酱草,均为植 物药成品,购自于无锡荣康药店。 1.2.2 中药液制备:取各中药20g ,加水浸泡过夜后,煮沸45 ~60min,浓缩至20mL,成为含药液1g /mL的浓液。 1.3 培养基 1.3.1 空白培养基:BL液体培养基,本所自制。 1.3.2 含中药培养基配制:取BL培养基2倍浓液和药液浓 液,按一定的配比配制成中药浓度分别为6.25%、12.5%、 25%、50%的培养基。 1.4 仪器:721分光光度计(上海分析仪器厂),超净工作台, 冷冻离心机(上海离心机研究所)。 1.5 方法 1.5.1 双歧杆菌的液体培养:取冰箱保存的双歧杆菌BM3接 种至BL液体培养基中,37e厌氧培养20h,再取生长好的菌液 以5%的接种量转接新鲜配制的BL液体培养基中,同上培养。 1.5.2 含中药的培养基接种及培养:取生长良好的BM3液 体,倒入无菌离心管中,4000r/min离心10min,倾去上清液,加 入3mL无菌生理盐水,混匀后血球计数,再将此液适当稀释, 调整菌液浓度108个/mL,取0.1 mL转接入各含中药的10mL 培养基中,37e厌氧培养20h。 1.5.3 各中药对双歧杆菌增殖效果的判定方法:将接种好的 含中药的培养基和不含中药的培养基,稀释10倍,分别检测 其在波长600nm处的吸光度OD对照,再取同样的接种后的培养 基,37e厌氧培养20h后,同上稀释10倍并检测其在波长 600nm处的吸光度OD样品,求出各培养基OD的增殖$OD,令E =$OD样品-$OD对照,若E0,说明该中药品种对双歧杆菌有 增殖作用,若E[0,说明该中药品种对双歧杆菌无明显的增殖 作用。 2 结果 2.1 不同中药对双歧杆菌的增殖效果比较 将培养液分别配制成含各中药分别为12.5%和25%两种 浓度,按每10mL培养液中接入菌悬液(浓度为108个/mL)0. 1mL方法接种后,37e厌氧培养20h后,稀释10倍测吸光度 OD600,计算E值,结果见表1。 如表1所示,E值大于0,即在体外培养的情况下对双歧 杆菌有增殖效果的依次为浓度12.5%黄芪、芦根、桠葫芦。同 一中药在不同浓度情况下E值不同,表明对双歧杆菌的增殖 效果存在明显差异。 2.2 中药浓度对双歧杆菌生长的影响 取对双歧杆菌有增殖效果的中药品种黄芪,配制成6. 25%、12.5%、25%、50%的浓度,检测各浓度对双歧杆菌生长 的影响,结果见表2。 表2 中药浓度对双歧杆菌生长的影响 黄芪浓度 (%)培养前OD600培养后OD600$OD E值增殖作用 0 0.033 0.085 0.052 6.25 0.136 0.218 0.082 0.030有 12.5 0.205 0.305