微生物代谢控制发酵(第五章).pptVIP

微生物代谢控制发酵 王 腾 飞 wangtengfei1981@163.com第五章 代谢控制发酵的应用 第一节 糖代谢与控制 糖代谢的途径；糖代谢的调节机制 第二节 柠檬酸发酵机制与代谢调控 柠檬酸的生物合成途径；柠檬酸生物合成中的代谢调节与控制；柠檬酸发酵的产率；柠檬酸产生菌的育种 第三节 脂类代谢与控制 脂类代谢与调节；谷氨酸的生物合成途径；谷氨酸代谢调节机制；谷氨酸生产菌的育种思路 第五章 代谢控制发酵的应用 第四节 氨基酸代谢控制与发酵 赖氨酸的生物合成途径；赖氨酸代谢调节机制；赖氨酸生产菌的育种思路 第五节 核苷酸类物质的代谢控制与发酵 核苷酸生物合成的调节机制；肌苷发酵的代谢控制育种 第六节 抗生素发酵的代谢与控制 抗生素的基本合成途径、关键酶、调控措施。 各种代谢途径的利用比例 多种代谢途径可以同时存在于一个细胞内，不同代谢途径在细胞中存在的比例因微生物不同而异 只有少数细菌以HMP途径作为有氧分解的唯一途径，如醋酸杆菌等；而有些微生物中只有EMP或ED途径 TCA 三羧酸循环（Tricarboxylic acid cycle；TCA cycle）又柠檬酸循环（Citric Acid Cycle），是需氧生物体内普遍存在的代谢途径，因为在这个循环中几个主要的中间代谢物是含有三个羧基的柠檬酸，因此得名；或者以发现者汉斯·阿道夫·克雷伯命名为克雷伯氏循环，简称克氏循环（Krebs cycle）。 三羧酸循环是三大营养素（糖类、脂类、氨基酸）的最终代谢通路，又是糖类、脂类、氨基酸代谢联系的枢纽。 ATP + 0.5ADP 能 荷 (Energy charge) （2）生物素的调节 生物素是羧化酶的辅酶，它本身就是一种B族维生素B7。 生物素主要是影响糖代谢的速度 生物素充足时，糖分解速度提高，造成乳酸积累 生物素缺乏时，丙酮酸氧化能力下降，乙醛酸途径基本是封闭的 第二节 柠檬酸发酵机制与代谢调控 柠檬酸??citric acid??  1、柠檬酸的发酵机制 2、柠檬酸的代谢控制 能够生产柠檬酸的微生物很多 工业上以淀粉糖为原料直接发酵生产柠檬酸的主要是曲霉属（Aspergillus）菌株 黑曲霉（Aspergillus niger） 柠檬酸发酵优良突变株的筛选 1、形态学观察法 柠檬酸发酵优良突变株的筛选 2、透明圈法 柠檬酸发酵优良突变株的筛选 3、显色圈法 柠檬酸发酵优良突变株的筛选 4、高渗透压法 柠檬酸发酵优良突变株的筛选 5、选育不分解柠檬酸的突变株 柠檬酸发酵优良突变株的筛选 6、选育某些氨基酸缺陷的突变株 如：谷氨酸缺陷型、精氨酸缺陷型等 多不饱和脂肪酸 含两个或两个以上双键且碳原子数为16-22的直链脂肪酸。如γ－亚麻酸，花生四烯酸，二十二碳六烯酸等。 多不饱和脂肪酸可广泛用于医药、食品、化装品、饲料等领域。 γ -亚麻酸 是人体不能缺少、自身又不能合成或替代的必需脂肪酸。 人体一旦缺乏，首先至关重要的前列腺素PGE1、PGE2、PGE3、就不能合成，免疫、心脑血管 生殖内分泌等系统就会出现异常，发生紊乱，从而引起高血脂、高血压、血栓症、动脉粥样硬化、风湿病、糖尿病、皮肤粗糙、加速衰老化等一系列疾病。 特别是对脑组织的生长发育相当重要，因为脑重量的20%是由必需脂肪酸组成的。 产生菌：多用被孢霉、毛霉、红教母、小克银汉霉 γ-亚麻酸　Gamma linolenic Acid（十八碳三烯酸，维生素F，Octadecatrienoic Acid，GLA） 育种措施1：切断或减弱支路代谢 育种措施3：增加前体物质的合成 谷氨酸的生物合成机制与代谢调节 ?谷氨酸发酵作为重点： （1）是代谢控制发酵的重点? ? ? ? ? ? ? ? ? （2）是目前代谢控制发酵中，在理论与实践上最成熟的 一、谷氨酸的生物合成途径 主要有： Glucose的酵解，EMP? ? ? ? ? ? Glucose的有氧氧化，HMP? ? ? ? ? ? 丙酮酸的有氧氧化，TCA循环? ? ? ? ? ? 乙醛酸循环途径，DCA循环? ? ? ? ? ? CO2固定反应? ? ? ? ? ? α-KGA（α-酮戊二酸）的还原氨基化 这6条途径之间是相互联系和相互制约的。 二、谷氨酸代谢调节机制 谷氨酸发酵是控制磷脂合成代谢的典型例子。 正常情况下，谷氨酸产生菌的细胞膜不允许谷氨酸从细胞内渗透到细胞外。在谷氨酸发酵过程中，一般是通过控制生物素亚适量、添加吐温60或青霉素等手段来调节细胞膜的渗透性，使细胞允许谷氨酸从细胞内渗透到细胞外。 （1）优先合成 谷氨酸比天冬氨酸优先合成，谷氨酸合成过量后，抑