第十三章 色谱分析法导论.pptVIP

第十二(1)章 色谱分析法导论 Chromatography 一、色谱分析法简介 1、色谱法的产生 色谱法是一种分离技术，它是俄国植物学家茨维特1906年创立的。分离植物叶子中的色素时，将叶片的石油醚（饱和烃混合物）提取液倒入玻璃管中，柱中填充CaCO3粉末（CaCO3 有吸附能力)，用纯石油醚洗脱（淋洗）。色素受两种作用力影响 （1）一种是CaCO3 吸附，使色素在柱中停滞下来 （2）一种是被石油醚溶解，使色素向下移动 各种色素结构不同，受两种作用力大小不同，经过一段时间洗脱后，色素在柱子上分开，形成了各种颜色的谱带，这种分离方法称为色谱法。 12-1 概述 12-1 概述 色谱法中共使用两相 固定相—固定不动的相 CaCO3 流动相—推动混合物流动的液体 石油醚 色谱法：混合物在流动相的携带下通过色谱柱分离出几种组分的方法。 流动相 12-1 概述 固定相： （1）固体吸附剂：CaCO3、Al 2O3等 （2）液体固定相（载体+固定液——高沸点有机化合物，涂在载体上） 色谱分离法一定是先分离。后分析 一定具有两相；固定相和流动相 分离：利用组分在两相中分配系数或吸附能力的差异进行分离 随着被分离样品种类的增多，该方法广泛地用于无色物质的分离，“色谱”名称中的“色”失去了原有的意义，但“色谱”这一名称沿用至今。 我国情况 我国在色谱分析领域的研究起于1954年，由中国科学院大连化学物理研究所首先开发。经过几十年的努力，我国色谱基础理论研究和应用技术研究方面具有特色，居世界领先行列。 12-1 概述 4、特点： （1）分离效能高 （2）灵敏度高 （3）分析速度快 （4）应用范围广 二、色谱分析法分类 1、按两相状态分类 气相色谱—气体作流动相 （1）气固色谱：气体作流动相，固体吸附剂作固定相。 （2）气液色谱：气体作流动相，固定液作固定相。 液相色谱—液体作流动相 （1）液固色谱：液体作流动相，固体吸附剂作固体相。 （2）液液色谱：液体作流动相，固定液作固定相。 超临界液体色谱——超临界流体作色谱流动相。 二、色谱分析法分类 2、按操作形式分类 （1）柱色谱： 填充柱色谱—固定相填充到柱管内 毛细管柱色谱—把固定相涂在毛细管内壁上，中间是空的。 （2）纸色谱：滤纸为固定相的色谱法，流动相是含一定比例水的有机溶剂，样品在滤纸上展开进行分离。 （3）薄层色谱：把固体固定相压成或涂成薄膜的色谱法。 二、色谱分析法分类 3、按分离原理分类 （1）吸附色谱：利用吸附剂表面对被分离的各组分吸附能力不同进行分离。 （2）分配色谱：利用不同组分在两相分配系数或溶解度不同进行分离。 （3）离子交换色谱：利用不同组分对离子交换剂亲和力不同进行分离。 （4）凝胶色谱：利用凝胶对分子的大小和形状不同的组分所产生的阻碍作用不同而进行分离的色谱法。 § 12(1)-2 色谱图及色谱常用术语 一、色谱图 混合物样品（A+B）→色谱柱中分离→检测器→记录下来。组分从色谱柱流出时，各个组分在检测器上所产生的信号随时间变化，所形成的曲线叫色谱图。 记录了各个组分流出色谱柱的情况，又叫色谱流出曲线 二、色谱图中的基本术语 二、色谱图中的基本术语 1、基线—在实验操作条件下，色谱柱后没有组分流出的曲线叫基线。 稳定情况下，一条直线。 基线上下波动称为噪音。 二、色谱图中的基本术语 2、色谱峰的高度h （1）峰高h —色谱峰最高点与基线之间的距离，可用mm ,mV， mA表示。峰高低与组分浓度有关，峰越高越窄越好。 二、色谱图中的基本术语 3. 色谱峰的宽度 标准偏差— σ 峰高0.607倍处的色谱峰宽的一半。 峰底宽Wb—色谱峰两侧拐点所作切线在基线上的距离 Wb =4 σ 半峰宽W1/2—峰高一半处色谱峰的宽度 W1/2 =2 .354 σ Wb =4 σ W1/2 =0.589Wb 二、色谱图中的基本术语 4. 色谱峰面积A ——色谱峰与峰底所围的面积。 对于对称的色谱峰 A=1.065h W1/2 对于非对称的色谱峰 A=1.065h(W 0.15+W 0.85)/2 5. 色谱保留值——定性的依据 组分在色谱柱中停留的数值，可用时间t 和所消耗流动相的体积来