色谱分析的一般步骤.pptVIP

色谱分析的一般步骤 * * 主要内容 色谱分析简介、分类及特点 色谱分析的一般流程 常见色谱仪的主要部件 1.色谱分析简介、分类及特点 色谱法（chromatography）又称“色谱分析”、“色谱分析法”、“层析法”，是一种分离和分析方法。 色谱原型装置：俄国植物学家茨维特在1906年使用的装置 1.1简介 1.2分类 色谱法简单分类 高效液相色谱仪 平 板 色 谱 色谱法的特点 高分离度 高速度 高灵敏度 高容量 高灵活性 高效率 作为检测手段 作为制备手段 分离方式众多 应用范围广 2.色谱分析的一般流程 样品预处理 前处理的目的都是一致的，就是提纯目标物，并使背景简单，使样品适合检测仪器的要求，提高检出限，避免污染。 一般有溶剂萃取、热解吸、顶空、洗脱、酯化、衍生等等。 气相色谱预处理：化学衍生化 、裂解色谱技术 、分离与富集 气相色谱法的一般流程 高效液相色谱分析的流程 由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统，然后输出，经流量与压力测量之后，导入进样器。被测物由进样器注入，并随流动相通过色谱柱，在柱上进行分离后进入检测器，检测信号由数据处理设备采集与处理，并记录色谱图。废液流入废液瓶。遇到复杂的混合物分离（极性范围比较宽）还可用梯度控制器作梯度洗脱。这和气相色谱的程序升温类似，不同的是气相色谱改变温度，而HPLC 改变的是流动相极性，使样品各组分在最佳条件下得以分离。 3.常见色谱仪的主要部件 进样系统 检测系统(色谱柱) 检测系统 温控系统 记录系统 气相色谱仪的组成部分： 载气系统、进样系统、分离系统、温度控制系统、检测记录系统。 高效液相色谱仪组成部分： 高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、数据处理系统及梯度洗脱等辅助装置。 气相色谱仪 载气系统 包括气源、净化干燥管和载气流速控制； 常用的载气有：氢气、氮气、氦气； 净化干燥管：去除载气中的水、有机物等杂质（依次通过分子筛、活性炭等）； 载气流速控制：压力表、流量计、针形稳压阀，控制载气流速恒定。 进样系统 进样系统：进样器+气化室； 气体进样器（六通阀）：推拉式和旋转式两种。 试样首先充满定量管，切入后，载气携带定量管中的试样气体进入分离柱； 液体进样器： 不同规格的专用注射器，填充柱色谱常用10μL；毛细管色谱常用1μL；新型仪器带有全自动液体进样器，清洗、润冲、取样、进样、换样等过程自动完成，一次可放置数十个试样。 微量注射器 气化室：将液体试样瞬间气化的装置。无催化作用。 分离系统（色谱柱） 作用：将混合物中各组分在一定色谱条件下实现分离，是色谱仪的核心部件。包括填充柱和毛细管柱。 柱材料：金属、玻璃、融熔石英、Teflon等 填充柱：多为U形或螺旋形，内径2~4 mm，长1~6m，由柱管和固定相组成。 毛细管柱：又叫开管柱。通常将固定液均匀地涂渍或交联到内径0.1~0.5mm的毛细管内壁，长达几十至100m。通常弯成直径10~30cm的螺旋状。 填充柱 毛细管柱 分离室：准确控制分离需要的温度。当试样复杂时，分离室温度需要按一定程序控制温度变化，各组分在最佳温度下分离； 温控系统 温度是色谱分离条件的重要选择参数； 气化室、分离室、检测器三部分在色谱仪操作时 均需控制温度； 气化室：保证液体试样瞬间气化； 检测器：保证被分离后的组分通过时不在此冷； 检测系统 色谱仪的眼睛， 通常由检测元件、放大器、显示记录三部分组成； 被色谱柱分离后的组分依次进入检测器，按其浓度或质量随时间的变化，转化成相应电信号，经放大后记录和显示，给出色谱图； 检测器： 浓度型——检测信号值与组分的浓度成正比； 质量型——检测信号值与单位时间内进入检测器组分的质 量成正比； 广普型——对所有物质均有响应； 专属型——对特定物质有高灵敏响应； 常用的检测器：热导检测器、氢火焰离子化检测器； 热导检测器(TCD) 单臂 四臂 柱前 柱前 柱后 柱后 氢火焰电离检测器（FID）