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实时定量RTPCR检测急性早幼粒细胞白血病PMLRARa融合基因_医学论文 实时定量RTPCR检测急性早幼粒细胞白血病PMLRARa融合基因_医学论文 作者：段连宁 郎丽 李惠民 刘华 王义民 张学美 【摘要】 本研究旨在建立用实时定量RTPCR检测急性早幼粒细胞白血病（APL）PMLRARa mRNA的方法，探讨APL PMLRARa融合基因表达水平与疗效的关系。用RTPCR扩增培养的NB4细胞的PMLRARa融合基因，取1μg NB4细胞的总cDNA进行10倍的梯度稀释，作为标准品，建立荧光定量RTPCR方法，对方法的灵敏性、稳定性、重复性进行了测定。定量检测4例急性早幼粒细胞白血病（APL）患者治疗前后骨髓内PMLRARa融合基因转录本水平，并对1例经治疗完全缓解后又复发的患者PMLRARa转录本水平（拷贝数）进行动态监测。结果表明：用本研究 建立的实时定量RTPCR方法可检测出10-5 μg NB4细胞cDNA中的PMLRARa融合基因，其重复性的CT值，管间、批间变异系数（CV）分别为2.1%、3.8%。4例患者初治骨髓PMLRARa基因转录本水平的分别为1 884、5 533、1 803、4 677拷贝，平均为3 475拷贝。经ATRA+化疗治疗后其PMLRARa基因转录水平下降至40、135、79、229拷贝，平均为121拷贝。还有1例