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成骨细胞异体移植的免疫学初探_医学论文 成骨细胞异体移植的免疫学初探_医学论文 作者：郭刚　王臻　彭磊　韩天宇 【关键词】成骨细胞 关键词:成骨细胞移植免疫反应 摘要:目的对不同种系成骨细胞植入后体液免疫及细胞免疫水平进行检测，探讨组织工程骨组织植入体内后可能的免疫排斥机制，并为应用于工程骨的种子细胞寻找可靠的种系来源.方法行成骨细胞同胎、同种异系、异种及自体腹直肌袋内移植，分别于术后1，2，4和8wk行免疫学及组织形态学检测.结果各组动物在移植后1～2wk内均可检测到特异性抗体，异种移植组持续时间最久，而同种异系及异种组在移植后2wk检测到细胞介导的细胞毒反应，4wk达高峰，异种组指标高于同种异系组.结论自体、同胎及同种异系细胞均可作为组织工程骨移植可靠的细胞来源，而异种细胞需进行一定的处理才可应用于工程组织的构建. 　　Keywords:osteoblasttransplantationimmunologicalreac-tion 　　Abstract:AIMTodetectthecellularimmunityandhu-moralimmunityofdifferentstirpsosteoblasttransplantation，andtodiscussthepotentialimmunologicalmechanismandfindthereliabalcellsourceoftissue-engineered-bone.METHODSTheosteoblastsofthesameventer，allostrip，heterogeneityandautogeneityweretransplantedintotherec-tusabdominusmuscleofeachrabbit.Immunologicaltestsandhistologicalobservationwereperformed1，2，4and8weekfollowingtransplantation.RESULTSAspecifcanti-bodyreactionwasdetectedinallgroupsonetotwoweeksaf-tertransplantation，andinheterogeneitygrouppersistedthelongesttime.Acellmediatedcytotoxicitywasdetectedinal-lostripandheterogeneitygroupstwoweeksaftertransplanta-tion，andreachedthepeakvaluefourweekslater，thevalueofheterogeneitygroupwashigherthanthatofallostripgroup.CONCLUSIONThesameventer，autogeneityandallostriposteoblastscanbethereliablecellsourcefortissue-engineeringbone.Heterogeneitycellsneedtobeprocessedbeforetheyareusedintissue-engineering. 　　0引言 　　将组织工程肌肉、皮肤及软骨等组织应用于临床实验的有报道［1］.同时骨及软骨细胞移植在替代治疗及基因治疗中的作用也得到广泛重视［2，3］.我们通过成骨细胞异体移植诱导的体液及细胞免疫水平进行检测，从移植生理学及种系的角度探讨骨细胞移植及组织工程骨种子细胞的可靠来源，进一步确定骨细胞及组织工程骨移植的临床应用价值及适用范围. 　　1材料和方法 　　1.1材料①兔成骨细胞原代培养.取材于5wk大耳白兔胫骨骨膜，剪碎后分别用2.5g#12539L-1胰蛋白酶30min及2.5g#12539L-1II型胶原酶1h消化后，用含150mL#12539L-1新生牛血清的M-199（青霉素/链霉素10万U#12539L-1，谷氨酰胺300g#12539L-1）在37℃，50mL#12539L-1CO2孵箱内培养14d长满单层，胰酶消化传代至第6代，光镜下观察到钙结节，碱性磷酸酶染色进行细胞鉴定.②SD大鼠成骨细胞原代培养［6］.取材于出生后3dSD大鼠颅骨，剪碎后用500mg#12539L-1胰酶及1000mg#12539L-1II型胶原酶混合消化液孵育1h后，用同上培养液37℃，50mL#12539L-1CO2孵箱内培养7d长满单层，胰酶消化传代至第4代，光镜下观察到钙结节，碱性磷酸酶染色法进行细胞鉴定. 　　1.2方法大耳白家兔40只（其中同胎12只），青紫蓝家兔12只，雌雄不限，体质