拟apoE对小鼠蛛网膜下腔出血及脑血管痉挛的治疗作用_医学论文.docVIP

拟apoE对小鼠蛛网膜下腔出血及脑血管痉挛的治疗作用_医学论文 拟apoE对小鼠蛛网膜下腔出血及脑血管痉挛的治疗作用_医学论文 【摘要】 目的： 探讨新合成的拟载脂蛋白E（apoE）对蛛网膜下腔出血（SAH）的治疗作用及机制. 方法： 55只C57BL6/JL小鼠随机分为： 假手术组，SAH组，低剂量（SAH＋apoE1410， 0.6 mg/Kg）组和高剂量（SAH＋apoE1410， 1.2 mg/Kg）组. 显微操作戳破右侧大脑中动脉(MCA)和大脑前动脉(ACA)分叉处造成SAH模型. 术后30 min开始经尾静脉给药，每12 h一次，连用3 d. 每日检测小鼠的一般精神状态、神经功能评分、综合运动能力评分. 术后第3日测量MCA直径. 结果： 术后SAH组小鼠精神萎靡，食欲下降，有的难进食水，体质量下降，死亡率为42.8％. 高、低剂量组与SAH组比较，一般症状明显减轻，死亡率分别为14.2％和18.8％，与SAH组比较，显著降低（0.05）. MCA直径在假手术组为（111.3±7.4）μm，与SAH 组（55.2±17.8） μm比较，平均缩小了59%（0.05）；低、高剂量组MCA分别为（91.4±16.4）μm和（83.5±13.6）μm，与SAH组（55.2±17.8）μm比较，MCA痉挛程度下降（0.05）. 神经功能评分在SAH组（6.7±1.8）明显低于假手术组（21.0±0.0, 0.05）；高剂量组（10.6±4.8）、低剂量组（10.9±2.6）的神经功能评分分别明显高于单纯SAH组（6.7±1.8, 0.05）；但在两个剂量组间未见差别（Pgt0.05）. 综合运动能力评分在SAH组（58.8±25.7）明显低于假手术组（272.2±25.7, 0.05）；高剂量组（95.5±13.2）,低剂量组（95.6±18.5）的综合运动能力分别明显高于单纯SAH组（58.8±20.9, 0.05）. 结论： 外源性拟apoE对SAH及脑血管痉挛有一定的治疗作用， 其机制与降低神经系统对损伤的炎性反应有关，拟apoE有可能成为治疗SAH的新措施. 【关键词】 蛛网膜下腔出血；拟apoE；apoE基因；脑血管痉挛 　　载脂蛋白E（apoliopoprotein E， apoE）在中枢神经系统的生理、病理作用越来越受到重视. 完整的apoE分子量大，正常状态下不能通过血脑屏障，限制了其作为外源性药物的治疗性应用［1］. 内源性apoE或脑室内注射apoE全蛋白通过下调中枢神经系统炎症反应、减轻氧化应激、抗兴奋性氨基酸毒性、直接增加神经营养等作用发挥神经保护作用［2］拟apoE（133149）是体外重组来自apoE受体结合区的一个17肽，外源性给药能透过血脑屏障，同时保留了apoE全蛋白的许多特性［3-4］. 但有关体外重组apoE片断用于SAH的治疗性研究，目前国内外还少见报道. 蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage, SAH）患者脑脊液apoE水平下降，提示apoE与SAH的病理机制有关［5-6］. 本研究采用静脉给药，旨在探讨拟apoE1410对实验性SAH及脑血管痉挛是否具有治疗作用. 　　1材料和方法 　　1.1材料 　　拟apoE1410的合成：拟apoE1410， cetylASAibLRKLAibKRLLamide，12肽，分子量：1410D. 由北卡罗来纳州立大学肽合成实验室合成. Leica手术显微镜（德国Leica公司）；显微手术用器械，包括弯头手术镊，手术剪刀，阻血夹及其持器等（瑞士）. 小动物呼吸机，麻醉机，血气分析仪（美国Harvard公司）；转棒仪（意大利Ugo Basile公司）；图像采集及图像分析系统(加拿大图像研究公司，型号MCIDM5)；脑血管灌注装置，灌注胶（杜克大学多学科神经保护实验室）. 　　1.2方法 　　1.2.1动物分组及SAH模型制备 　　C57BL6/J L雄性小鼠55只，12～14 wk. 随机分为4组：假手术组（4只）；SAH（SAH+盐水）组（21只）；低剂量（SAH＋apoE1410 ，0.6 mg/kg）组（14只）和 高剂量（SAH＋apoE1410，1.2 mg/kg）组（16只）. 将小鼠气管插管，连接呼吸机，监测血压、血气和体温，控制在生理状态，显微手术戳破大脑中动脉(middle cerebral artery，MCA)和大脑前动脉(anterior cerebral artery，ACA)分叉处造成SAH模型. 拟apoE1410溶于PBS，经尾静脉注射，SAH术后30 min开始第一次，每12 h 一次，共用3 d，其它两组只注射生理盐水. 　　1.2.2神经功能检测评