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旱莲草总黄酮的提取及其体外抗氧化活性研究_药学论文 旱莲草总黄酮的提取及其体外抗氧化活性研究_药学论文 作者：王雪梅 张建胜 戴云 高云涛 【摘要】 　　目的研究旱莲草总黄酮的提取及其抗氧化活性。方法利用Fentaon反应产生羟自由基·OH，光照核黄素产生超氧阴离子自由基O-2·，采用分光光度法研究旱莲草体外清除活性氧自由基的作用，用硫代巴比妥酸（TBA）分光光度法研究其对·OH诱发卵磷脂脂质过氧化和DNA氧化损伤的抑制作用。结果旱莲草总黄酮得率为3.96%，对·OH、O-2·的半清除率IC50为0.015 mg·ml-1，0.08 mg·ml-1;对脂质过氧化DNA氧化损伤的半抑制率为0.02 mg·ml-1，2.0 μg·ml-1。结论旱莲草总黄酮能有效清除活性氧自由基，对卵磷脂脂质过氧化和DNA氧化损伤有显著抑制作用。　 【关键词】 旱莲草； 总黄酮； 抗氧化 　　Abstract：ObjectiveTo study the extraction of flavone from Eclipta alba and its antioxidation function.MethodsScavenging effects of Eclipta alba on active oxygen species ·OH and O·-2 generated by Fenton reaction and riboflavine photosensitization were investigated by the means of spectrophotometry. The inhibitory effects of Eclipta alba on the lecithin lipid peroxidation and damage of DNA chain induced by hydroxyl radical were observed by thiobarbit uric acid spectrophotometry.ResultsTotal flavonoids in Eclipta alba was 3.96%; the semi-clearance rate of ·OH and O·-2was 0.015 mg·ml-1 and 0.08 mg·ml-1; the semi-inhibition rate of Lecithin lipid peroxidation and oxidation damage of DNA was 0.02 mg·ml-1 and 2.0 μg·ml-1.ConclusionEclipta alba can scavenge active oxygen efficiently. It can also significantly inhibit lipid peroxidation and damage of DNA by hydroxyl radical. 　　Key words：Eclipta alba; Flavone; Antioxidation 　　旱莲草Eclipta alba是菊科植物鳢肠Ecliptaprostratal L. 的干燥地上部分。各个不同的地区有许多别名,如墨旱莲、水旱莲、墨斗草等［1］。中医用其滋补肝肾，凉血止血。现代药理研究证明墨旱莲具有止血、保肝、免疫调节、抗诱变以及抗菌抗炎等病症［2］。在傣族传统医药中，旱莲草被称为皇旧，有治疗风湿麻木、痿软偏瘫、头痛耳聋、尿路感染、各种出血、黄疸等作用。同时，旱莲草在食用方面也有较广泛的应用,有“亦蔬亦药”的说法［3］。植物中的黄酮类成分均有一定的抗氧化活性［4］，有研究报道旱莲草的黄酮类成分具有免疫调节作用［5］，但关于旱莲草黄酮类成分的抗氧化活性研究目前鲜有报道。本实验对旱莲草总黄酮的提取及其体外抗氧化活性进行了研究。 　　1 器材 　　旱莲草（购至当地中药店），核黄素（VB2），氯化硝基四氮唑兰（NBT）（购至ChemBase公司），番红花红（Safranine T），蛋氨酸，鲱鱼精DNA（购至sigma公司），2-硫代巴比妥酸（TBA），三氯乙酸（TCA），无水乙醇，亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，石油醚，所用试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。 　　9200型紫外可见分光光度计（北京瑞利分析仪器公司），数显恒温水浴锅，低温超速离心机，光照箱（自制，35 cm×30 cm×25 cm，光源为纯稀土节能灯，灯功率45 W）。 　　2 方法 　　2.1 旱莲草总黄酮成分的提取［6］称取旱莲草粉末12 g，用20倍量的85 %的乙醇超声浸提45 min，过滤，滤渣再用20倍量的85 %的乙醇超声浸提45