染料木素促乳癌细胞增生和IGF1R mRNA 表达机制_医学论文.docVIP

染料木素促乳癌细胞增生和IGF表达机制_医学论文 染料木素促乳癌细胞增生和IGF表达机制_医学论文 【摘要】目的研究染料木素促人乳癌（MCF）细胞增生及IGF表达机制。方法MCF细胞常规培养后，用ICI182,780或JB与染料木素共同培养，以阻断雌激素受体（ER）或IGF。MTT法观察细胞生长情况，RT技术观察IGF基因表达情况。结果染料木素对MCF细胞具有增生效应，与对照组相比差异有统计学意义(F=14.627，q=3.76,0.05)，此效应可以被ER拮抗剂ICI182,780或IGF拮抗剂JB完全阻断(q=3.89、4.25,0.05)；染料木素可增加IGF基因表达(F=21.695,q=4.94,0.01），此效应也能够被ICI182,780或JB完全阻断(q=5.03、5.89,0.01）。结论染料木素可以促进MCF细胞的增生和IGF的表达，此作用可以被ER拮抗剂ICI182,780或IGF拮抗剂JB完全阻断。 【关键词】染料木素；受体,IGF1型；受体,雌激素；乳腺肿瘤 　　［ABSTRACT］ObjectiveTostudythemechanismofstimulatingeffectsofgenisteinonbreastcancercellproliferationandIGFegrowthfactor1receptor(IGF1R).ThecellproliferationwasobservedviaMTTmethod.TheIGF1RmRNAexpressionwasdetectedbyRTPCR.ResultsGenisteinstimulatedthegrowthofMCF7cells(F=14.627,q=3.76,0.05),whichcouldbecompletelyblockedbyERantagonistICI182,780orIGF1RantagonistJB1(q=3.89,4.250.05).GenisteinincreasedtheIGF1Rgeneexpression(F=21.695,q=4.94,0.01)andthiseffectcouldalsobeentirelyblockedbyICI182,780orJB1(q=5.03,5.890.01).ConclusionGenisteincanstimulateMCF7cellproliferationandIGF1Rgeneexpression,whichcanbetotallyblockedbyERantagonistICI182,780andIGF1RantagonistJB1. ［KEYWORDS］GenisteinReceptor,IGFtype1Receptors,estrogenBreastneoplasms 染料木素是大豆异黄酮的主要活性成分，其化学结构和雌激素相似，是已知的植物雌激素。研究显示，染料木素可以与雌激素受体(ER)结合，发挥其类雌激素样作用[1]，其类雌激素样作用有助于改善绝经期妇女潮热、抑郁和阴道炎等症状，由于雌激素在调节骨的内稳态以及防止绝经后骨量丢失方面发挥重要作用[2]，因此，染料木素对骨质疏松的发生也有预防作用。生理剂量的染料木素能够促进ER阳性的人乳癌(MCF细胞增生[3]。有研究表明，染料木素对MCF细胞的促进作用是通过其类雌激素样的作用机制实现的。染料木素通过与ER结合，激活一系列与细胞增生相关的雌激素反应基因[4]，从而促进ER阳性的MCF细胞的增生。近期研究显示，在ER阳性的MCF细胞中，ER途径和IGF途径存在着交互作用[5]。染料木素是否也可以通过ER信号转导途径与IGF信号转导途径的交互作用，发挥其对ER阳性的MCF细胞的增生效应，目前未见报道。因此，本研究应用ER阳性的乳癌细胞MCF模型系统，探讨染料木素对MCF细胞增生和IGF表达的调控机制，以期为染料木素的类雌激素样作用机制提供进一步的实验依据。 　　1材料与方法 　　1.1试剂及其来源 MCF细胞购自美国ATCC公司。DMEM培养基购自美国Invitrogen公司。Genistein购自美国Sigma公司。ICI182,780购自英国Tocris公司。 　　JB购自瑞士Bachem公司。逆转录聚合酶链反应试剂盒购自美国Promega公司。TagDNA聚合酶购自日本TAKARA公司。 　　1.2MCF细胞的培养 MCF细胞接种于96孔板或6孔板，用含体积分数0.05胎牛血清的DMEM培养基，于37℃含体积分数0.05CO2的培养箱中培养。细胞汇合达70％时，使用含10g/L活性炭处理的胎牛血清(sFBS)的无酚红DMEM继续培养72h。分别用染料木素(1μmol/L)、