桃核承气汤对庆大霉素肾毒性大鼠的治疗作用研究_药学论文.docVIP

桃核承气汤对庆大霉素肾毒性大鼠的治疗作用研究_药学论文 桃核承气汤对庆大霉素肾毒性大鼠的治疗作用研究_药学论文 作者：刘煜敏，张悦*，郝艳鹏，王飞，陆敏 【摘要】 目的观察桃核承气汤对庆大霉素所致大鼠肾毒性损伤模型的治疗作用及部分机制。方法采用腹腔注射庆大霉素法制作大鼠肾毒性模型，通过生化、病理检测和蛋白免疫印迹方法观察各组大鼠肾功能、肾组织病理形态、氧化产物及酶类的变化及信号通路分子p38、核因子κB(NF-κB)蛋白表达的变化，明确桃核承气汤的疗效。结果桃核承气汤治疗一周后，可改善肾功能，减轻肾组织病理改变，显著降低肾皮质MDA含量和NOS酶活性、提高SOD酶活性，NF-κB蛋白表达明显减少。结论桃核承气汤可以通过改善肾脏氧化损伤对庆大霉素肾毒性起到一定的治疗作用。 【关键词】 桃核承气汤;庆大霉素;核因子κB;肾毒性 　Abstract：ObjectiveTo study the therapeutic effect of Taohe Chengqi Decoction (TCD) on gentamicin-induced kidney lesion in rats.MethodsThe renal injury model was established by Gentamicin i.p. The kidney index，pathomorphology，and level of oxidative production and expression of Nuclear Factor-κB (NF-κB) protein in kidney cortex were measured to observe the effect of TCD on kidney injury of rats.ResultsAfter one week therapy, parameters of kidney indexes, oxidative production MDA and enzyme activity of NOS in kidney cortex of Gentamicin group were significantly decreased (0.05), and enzyme activity of SOD was significantly increased( 0.05). The protein expression of NF-κB was significantly down-regulated (0.05).ConclusionTaohe Chengqi Decoction has some therapeutic effect on Gentamicin-induced kidney lesion through alleviating renal oxidation. 　　Key words：Taohe Chengqi Decoction; Gentamicin; Nuclear Factor-κB; Kidney injury 　　氨基糖苷类抗生素庆大霉素(Gentamicin， GEN) 临床应用于严重革兰氏阴性菌抗感染治疗，但其肾毒性和耳毒性也是我们不可忽视的重要方面。调查显示，在庆大霉素治疗的病人中有0.5%～30%可发生中毒性肾损害。虽然其确切机制尚不完全清楚，但研究表明庆大霉素可增加反应性氧化产物的生成，通过脂质过氧化引起肾功能的改变是其肾毒性发生的重要原因。本研究主要观察经典方桃核承气汤对大鼠庆大霉素肾毒性是否具有保护作用并初步探索药物作用机制。 　　1材料与仪器 　　1.1 动物健康雄性Wistar大鼠(180±20)g共24只，由上海中医药大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(沪)2007-0005。 　　1.2 药物与试剂桃核承气汤组成：桃仁12 g，大黄12 g，桂枝6 g，甘草6 g，芒硝6 g，购自上海蔡同德堂药号，按比例称量，水煎，浓缩至生药浓度为0.438 g/ml，冰箱保存备用。硫酸庆大霉素注射液购自上海中西制药有限公司，批号080303。尿蛋白定量试剂盒，MDA、SOD、NOS检测试剂盒购自南京建成生物公司。兔抗鼠p38抗体、兔抗鼠NF-κB抗体购自Cell Signal公司，小鼠GAPDH- HRP抗体购自上海康成公司，山羊抗兔Ⅱ抗购自明睿生物有限公司。BCA蛋白定量试剂盒、ECL化学发光试剂盒购自美国Pierce公司，PVDF膜购自Millipore公司。其他试剂均为国产分析纯。 　　1.3主要仪器全自动生化分析仪(KONELAB公司)，752型紫外分光光度计(上海第三分析仪器厂)，酶标仪(BIOTEK公司)，电泳装置(美国Bio-Rad公司)。 　　2