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水通道蛋白_医学论文 水通道蛋白_医学论文 作者：石向群,杨金升,汪泳,包仕尧 【关键词】 水通道蛋白 　　【Abstract】 AIM：To examine the distribution of AQP4 in normal rat spinal cord so as to provide theoretical basis for further study on its physiologic function. METHODS: Immunohistochemical staining with antiAQp4 monoclonal antibody was performed on spinal tissue frozen sections from healthy adult SD rats. RESULTS: The positive staining cells mostly included ependymal cells of myelocoele, glial cells, motor neurons, and epithelial cells of spinal pia mater. The staining was mainly located on the cell membrane. Most importantly, it displayed certain directivity in the glial cells, mainly at the membrane side contacting with capillary endothelial cells. CONCLUSION: AQP4 is widely expressed in rat spinal cord. In the glial cells, it is mainly located at the membrane side contacting with capillary endothelial cells, which are associated with bloodbrain barrier, suggesting that AQP4 may be involved in spinal water metabolism. 　　【Keywords】 Aquaporin4 distribution rat spinal cord 　　【摘要】 目的： 明确正常大鼠脊髓内水通道蛋白4（AQP4）的表达与分布，为进一步研究其生理功能提供理论依据. 方法： 采用AQP4 mAb，对正常SD大鼠脊髓的冰冻切片进行免疫组织化学染色,检测AQP4蛋白的表达水平. 结果： 免疫组织化学染色结果显示阳性着色细胞包括有胶质细胞、中央管室管膜上皮细胞、脊髓前角运动神经元、软脊膜上皮细胞，着色部位主要在细胞膜，其中在胶质细胞表现出一定的方向性,主要分布在与毛细血管内皮细胞接触的一侧. 结论： AQP4在正常大鼠脊髓内具有广泛的表达，在胶质细胞上其表达分布于与血脑屏障相关的毛细血管内皮细胞的一侧. 其表达的解剖分布提示AQP4在脊髓内主要参与中央管内水代谢以及神经组织间的水代谢调节. 　　【关键词】 水通道蛋白4；分布；大鼠；脊髓 　　0引言 　　1988年第一个水通道蛋白（Aquaporin, AQP）被发现，1997年被正式认可命名，从而为极性水分子透过以脂质双分子层为特征的细胞膜提供了分子结构依据［1］. 目前已发现的水通道蛋白有11种，它们广泛分布于各种生命体中，参与介导调节水分子的跨膜转运. 研究发现水通道蛋白功能障碍已成为某些水代谢障碍疾病的中心环节［2］. 脊髓水肿是脊柱、脊髓损伤后的主要并发症之一，而且影响脊髓功能的恢复［3］，但目前尚缺乏对AQP4在脊髓组织中的分布以及生理功能的探讨. 我们采用免疫组织化学探讨AQP4在SD大鼠脊髓内的分布特点，依据结构与功能相一致的原则，推测其在脊髓内可能的生理功能，为脊髓内水代谢的调节和脊髓水肿的防治研究提供理论依据和新的思路. 　　1材料和方法 　　1.1材料 　　健康成年SD大鼠6只,体质量(300±25) g，雌雄各半，由苏州大学实验动物中心提供. AQP4兔抗大鼠mAb购于深圳达科为生物技术公司（美国ADI公司的产品），其抗原决定簇为AQP4 C端的17个氨基酸. 浓缩型抗兔SP免疫组织化学检测试剂盒及DAB浓缩显色液购于华美生物工程公司. 　　1.2方法 　　1.2.1标本采集给予大鼠36 g/L水合氯醛5 mL过度麻醉后经心脏快速灌注冰生理盐水300 mL，随后经心脏灌注40 g/L多聚甲醛PBS（pH 7.3）300 mL,先快后慢，灌注固定后