液相联用研究IS-5-MN缓释胶囊人体生物等效性_药学论文.docVIP

液相联用研究IS-5-MN缓释胶囊人体生物等效性_药学论文 液相联用研究IS-5-MN缓释胶囊人体生物等效性_药学论文 摘要：18名健康受试者随机交叉给药，分别单次（40mg）及多次口服国产5-单硝酸异山梨醇酯缓释胶囊和迸口缓释胶囊进行人体生物等效性研究。采用液相色谱/质谱联用测定血浆中IS-5-MN的的浓度，经数据处理，单次口服国产和进口5-单硝酸异山梨醇酯缓释胶囊的：AUC0-36分分别为7490.65±1144.06μg·h/L和7355.38±1007.36μg·h/L，Tpeak分别为4.92±1.31h和4.67±O.79h，Cmax分别为519.15±60.53μg/L和523.67±68.99μg/L；多次口服达稳态时：AUC0-36分别为8514.11±1318.07μg·h·L-1和8586.87±836.38μg·h·L-1，Tpeak分别为4.83±0.94h4.75±1.14h，Cmax分别为570.44±78.89μg·L-1和580.43±64.04μg·L-1，波动系数FI分别为135.10±15.53%和134.82±9.71%。对单次及多次给药所得梯形法计算的两者的AUC0-36，Cmax、Tdeak进行方差分析和双单车侧检验结果表明两者具有生物等效性。国产5-单硝酸异山梨醇酯缓释胶囊单次给药及多次给药稳态时的相对生物利用度分别为101.9±7.3%和99.1±11.9%。 关键词：IS-5-MN　　HPLC/MS　　生物等效性 　　5-单硝酸异山梨醇酯（isosorbide　5-mononitrate，IS-5-MN）是硝酸异山梨醇酯（isosorbidedinitrate，ISDN）主要代谢产物之一，其主要药理活性是松弛平滑肌。与硝酸异山梨醇酯相比，IS-5-MN具有吸收迅速、无首过效应、生物利用度高等特点。临床上主要用于预防心绞痛，在对充血性心力衰竭和血管痉挛性心绞痛的治疗方面应用日益广泛。有关IS-5-MN的测定方法的报道都是气相色谱-电子捕获法或毛细管电泳-电子捕获法测定，本试验建立液相色谱/质谱联用法（LC/MS）测定血浆中IS-5-MN的浓度，并用此方法对国产1S-MN缓释胶囊进行多剂量人体生物等效性研究。现将试验方法与结果报告如下： 材料和方法 1.1　试药及试剂 　　被试制剂：国产IS-5-MN缓释胶囊，40mg/粒，由北京第二制药厂研制。含量102.6%。批号980103。标准参比制剂：进口IS-5-MN缓释胶囊（商品名：德脉宁），40mg/粒，德国麦克乐制药公司生产的市售产品，合量：102%，批号1924A7。对照品：IS-5-MN，由北京第二制药厂提供，批号980127，含量：99.96%。试剂：甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，浓氨水、乙酸乙酯为分析纯。 1.2　仪器及色谱条件 　　Waters公司2690型高效液相色谱系统（带自动进样器），Waters公司Platform　LCZ质谱检测器，Masslynx工作站。3P97（生物利用度计算程序）由中国药理学会数学专业委员会编制。色谱条件：采用Waters　C18色谱柱（4μm，150mm×2.Onm）；柱温20℃；流动相：甲醇：氨水溶液（O.03mol·L-1）=20∶80（pH=7.8），流速O.25ml·min-1，进样量20μl。质谱条件：电喷雾电离源（ESI），选择性监测质荷比为（M/Z）190带负电荷的分子离子峰，电喷雾电压3.5KV，干燥气（N2）流速为368L·min-1，干燥气温度为250℃。 1.3　受试者及给药方法 　　18名健康受试者均为男性，年龄22-23岁，身高165-186cm，体重56-80kg。受试者在试验前进行体格检查．肝肾功能，心率、呼吸、血压及心电图均正常。受试者试验前两周及试验期同未服用其他任何药物。试验前均签署知情同意书。试验方案经卫生部北京医院伦理委员会批准通过。 　　采用随机交叉试验方法进行试验设计，单次与多次结合进行，18名受试者随机分成两组，第1天禁食12小寸后清晨8时空腹口服试验药品，其中9名口服被试制剂，9名口服标准参比制剂，剂量均为40mg，用温开水100ml吞服。受试者在服药抽血期间禁姻、酒，服药后2h给予统一低脂肪饮食。血样自给药后1，2，3，4，5，6，8，12，24，36h，取上肢静脉血3ml。 　　第3天（即48h）晨起8时受试者按前述方案继续服药（每日口服40mg试验药品），连服5天，第4、5、6、7、8天早晨服药前取血浆3ml，供测定谷浓度，以考察是否达到稳态；第8天服药后按第1天采血时间及方法采上肢静脉血3ml。 　　将血标本置于肝素化的试管中，离心（3000r/min，5min），分离出血浆。-20℃避光保存至测定。第一次试验结束二周后交叉给药重夏