淋巴结阴性乳腺癌患者骨髓细胞角蛋白检测及意义_医学论文.docVIP

淋巴结阴性乳腺癌患者骨髓细胞角蛋白检测及意义_医学论文 淋巴结阴性乳腺癌患者骨髓细胞角蛋白检测及意义_医学论文 作者：陈龙舟，王水，赵佳，王风良【摘要】 ［目的］ 探讨采用免疫细胞化学（ICC）和RT-PCR方法同时检测腋淋巴结阴性乳腺癌（axillary lymph nodes negative breast cancer，ALNNBC）患者骨髓微小转移的意义。［方法］ 对常规HE染色腋淋巴结阴性的62例乳腺癌患者采用免疫细胞化学（ICC）和RT-PCR方法检测骨髓细胞角蛋白CK19的表达情况。［结果］ ICC法检出CK19阳性表达率为14.52%（9/62），而RT-PCR方法检测则CK19阳性表达率为24.20%（15/62），两者差异有统计学意义（χ2=4.1667，P=0.0412）。［结论］ 常规病理检查腋淋巴结阴性的乳腺癌患者，用ICC法和RT-PCR法对其骨髓血作进一步检测，可以发现微小转移的存在，RT-PCR方法比ICC更敏感。 【关键词】 乳腺肿瘤 Detection of Cytokeratin in Bone Marrow in Breast Cancer Patients with Negative Axillary Lymph Nodes and its Significance Abstract: ［Purpose］ To investigate the significance of concurrent detecting cytokeratin in bone marrow with immunocytochemistry (ICC) and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) for breast cancer with micrometastases in bone marrow. ［Methods］ The expression of cytokeratin 19 (CK19) in bone marrow was detected by ICC and RT-PCR in 62 patients with negative axillary lymph nodes from HE-staining sections. ［Results］ The expression of CK19 was 14.52%(9/62) by ICC method, and 24.20%（15/62） by RT-PCR. The results were significantly different between the two methods（χ2=4.1667，P=0.0412）. ［Conclusion］ Even there is no axillary lymph nodes involvement in routine pathological examination, micrometastases could be detected in bone marrow by ICC and RT-PCR. RT-PCR is superior to ICC. Key words: breast neopalsms micrometastases bone marrow cytokeratin 侵袭和转移是导致乳腺癌治疗失败的主要原因。国内外对骨髓微小转移的研究显示，骨髓中长期存在肿瘤细胞是复发和转移的重要原因之一[1~5]，腋窝淋巴结阴性乳腺癌（ALNNBC）患者骨髓微小转移的检测，对于判断预后和指导治疗具有潜在价值。本研究采用免疫细胞化学（immunocytochemistry，ICC）和RT-PCR联合的方法同时检测ALNNBC骨髓的微小转移，探讨其临床意义。 1 材料与方法 1.1 一般资料 2004年6月至2006年12月，南京医科大学第一附属医院及淮安市妇幼保健院乳腺外科收治的女性乳腺癌患者，经病理检查确诊且腋淋巴结无转移者共62例， 所有患者术前行胸部X线片、肝脏B超和全身骨显像等检查未发现远处转移，临床分期Ⅰ~Ⅱ期，年龄29~76岁，平均52.47岁。 1.2 骨髓标本收集 所有患者均签署知情同意书，病人全身麻醉后取胸骨体作为穿刺部位，穿刺前抽取病人骨髓血5ml，肝素抗凝混匀，立即送实验室作进一步处理。 1.3 免疫组化检测 采用链酶亲和素—生物素—过氧化物酶复合物，标志物为细胞角蛋白（cytokeratin，CK19），抗CK单克隆抗体购自丹麦Dako公司，按试剂盒说明书要求进行操作。光学显微镜下观察检测结果，CK19阳性细胞被染成棕色，分布于细胞浆或细胞膜上。骨髓微小转移