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渗漉法提取丹参脂溶性部位的工艺研究_药学论文
渗漉法提取丹参脂溶性部位的工艺研究_药学论文
【摘要】 目的探讨丹参饮片中采用渗漉法提取脂溶性部位的最佳工艺条件。方法以丹参酮ⅡA和隐丹参酮的含量为指标,采用L9(34)正交实验进行提取工艺全面优选,并用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定其含量。结果最佳乙醇渗漉工艺为:药材粉碎至绿豆粒大,用15倍量95%乙醇冷浸24 h后,渗漉速度3 ml/min。结论采用渗漉法提取丹参中脂溶性部位,操作简便,方法可行,降低了生产成本,提高了药材利用率,使实验结果具有实际应用价值。
【关键词】 丹参; 正交实验; 丹参酮ⅡA; 隐丹参酮
Abstract:ObjectiveTo study the best extraction method of the liposolubility active principles of Rhizoma Salviae Miltiorrhizae.MethodsThe extraction process was studied by orthogonal design with the contents of Tanshinone ⅡA and cryptotanshinone determined by RP-HPLC as index.ResultsThe best extraction condition of liposolubility part was A3B1C2D2. That is to say, adding fifteen-times 95% alcohol, after 24 hours cold-soaking, percolateing with 3 ml/min.ConclusionThe extraction method for Rhizoma Salviae Miltiorrhizae can save time and energy and be suitable for the modern production.
Key words:Salvia miltiorrhiza; Orthogonal design; Tanshinone ⅡA; Cryptotanshinone
丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎。味苦,微寒,归心、肝经,具有祛淤止痛、活血通经、清心除烦之功效,用于月经不调、经闭痛经、癥瘕积聚、胸腹刺痛、疮疡肿痛、心烦不眠、肝脾肿大、心绞痛等病症。
丹参水溶性成分主要有丹参素以及丹参酚酸类,对这一部分的研究较多。丹参的脂溶性成分主要为丹参酮类化合物,主要成分有丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、隐丹参酮、二氢丹参酮等,具有天然抗氧化活性、天然心血管药理作用以及抗菌消炎作用,还具有明显的抗肿瘤作用。
1 器材
Aglient1100系列液相色谱仪(美国惠普公司);丹参酮、隐丹参酮对照品(中国药品生物制品检定所);丹参饮片(南京本草药店),经自我鉴定为丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的根。
2 方法与结果
2.1 丹参提取脂溶性成分指标的建立
2.1.1 干膏率测定参照2005年版《中国药典》附录XA浸出物测定法,精密量取相当于丹参5 g的药液,置于已干燥恒重的蒸发皿中,在水浴上蒸干后,于105℃干燥3 h,移于干燥器中冷却30 min,迅速精密称定重量,计算干膏收率,干膏收率(%)=干膏重量/丹参重量×100%。
2.1.2 丹参酮ⅡA、隐丹参酮的含量测定预试发现,由于丹参中丹酚酸类成分在波长268 nm处有着较强的紫外吸收,在进行提取工艺考察时,许多工艺在脂溶性成分被提出时,水溶性成分同时被提出,从而使UV法测定总丹参酮含量的方法在提取工艺考察过程中很不精确,故通过使用HPLC测定丹参酮ⅡA以及隐丹参酮的含量,对丹参脂溶性部位的提取工艺进行评价。
色谱条件:色谱柱为Scienhome KromasilC18(150 mm×4.6 mm)及预柱, 流动相为甲醇-水(75∶25 ),检测波长270 nm,柱温30℃,流速0.8 ml /min,理论板数以丹参酮ⅡA,隐丹参酮计均不低于2 000。图谱见图1~2。
图1 隐丹参酮、丹参酮ⅡA的色谱图(略)
图2 样品色谱图(略)
丹参酮ⅡA储备液的制备:精密称取用五氧化二磷干燥5h的丹参酮ⅡA对照品4.82 mg置50 ml棕色容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀。
隐丹参酮储备液的制备:精密称取用五氧化二磷干燥5 h的隐丹参酮对照品4.83 mg置25 ml棕色容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀。
混合标
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