生存素反义寡核苷酸对人胃癌细胞增殖的抑制作用_医学论文.docVIP

生存素反义寡核苷酸对人胃癌细胞增殖的抑制作用_医学论文 生存素反义寡核苷酸对人胃癌细胞增殖的抑制作用_医学论文 【关键词】 胃癌细胞 　　摘要 :目的 探讨生存素（survivin）反义寡核苷酸（ASODN）对人胃癌细胞SGC7901增殖的抑制作用。 方法 设计合成特异性靶向生存素的反义寡核苷酸。胃癌细胞株SGC7901分为4组:空白对照组、单纯脂质体对照组、正义链转染对照组、ASODN转染组。作用48h后收获各组细胞。Western blot法检测各组细胞生存素表达情况，流式细胞仪检测各组细胞凋亡率，MTT法检测各组细胞的生长抑制率。 结果 脂质体介导生存素反义寡核苷酸转染后的胃癌细胞出现生存素蛋白表达明显下降ASODN转染组细胞凋亡率明显高于各对照组（0.05），而各对照组间差异无显著性（Pgt0.05）ASODN转染组细胞的抑制率明显高于各对照组（0.05），而各对照组间差异无显著性（Pgt0.05）。 结论 生存素反义寡核苷酸转染胃癌细胞能下调生存素蛋白表达，诱导胃癌细胞凋亡，抑制细胞增殖，具有明显的抗癌作用。 　　关键词 :反义寡核苷酸生存素胃癌细胞 　　Abstract:Objective To investigate the inhibitory effects of survivin antisense oligonucleotide（ASODN）on human gastric carcinoma cell line SGC7901.Methods ASODN targeting survivin was designed and constructed.Cultured cancer cells were divided into4groups:sham control group，lipofectin control group，oligonucleotide（SODN）control group and ASODN test group.After transfection for48h，cultured cells were harvested to proceed with the tests for:survivin protein expression by Western blot，apoptotic rate（AR）by flow cytometry，the rate of inhibition（IR）by colorimetric MTT cell viability.proliferation assay.Results The expression of survivin in SGC7901cancer cells decreased after being transfected with survivin ASODN.The AR and IR in ASODN test group were significantly higher than in the control groups.Conclusions The expression of sur-vivin may be decreased in gastric cancer cells after ASODN transfection.Survivin ASODN can induce apoptosis and inhibit pro-liferation of SGC7901cells，and hence，may well be a prospective anti-cancer drug. 　　Key words:antisense oligonucleotidesurvivingastric cancer 　　胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，因其早期诊断率较低和易发生多药耐药，中、晚期胃癌的预后欠佳。近期研究显示，约80%的胃癌表达生存素（survivin）基因，且生存素的表达水平与胃癌患者的预后呈负相关［1-2］ 。基因治疗成为近年来研究的热点。进一步的研究表明，survivin反义核酸及显性负突变体能够诱导细胞自发性凋亡和明显抑制肿瘤的生长，为肿瘤基因治疗研究提供了新的靶位［3］ 。反义寡核苷酸（antisense oligonucleotide，ASODN）作为一种新型药物，通过多种途径介导靶基因的降解，抑制DNA的复制、转录和转录后的加工和翻译［4］ 。我们采用脂质体介导survivin反义寡核苷酸（survivin ASODN）转染人胃癌细胞SGC7901，以封闭survivin基因的表达，并观察其对胃癌细胞SGC7901凋亡的作用。 　　1 材料和方法 　　1.