电针对慢性应激模型大鼠肠道神经系统的影响_医学论文.docVIP

电针对慢性应激模型大鼠肠道神经系统的影响_医学论文 电针对慢性应激模型大鼠肠道神经系统的影响_医学论文 【摘要】 目的:探讨电针改善抑郁症引起的消化功能障碍的机制。方法:将30只Sprague Dawley雄性大鼠随机分为正常组、抑郁模型组、电针组，每组10只。采用生物化学试剂盒检测大鼠结肠组织中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、一氧化氮（NO）的含量，免疫组化SP法检测结肠组织环氧合酶-2（COX-2）的表达。结果:与正常组比较，慢性应激使模型组大鼠结肠组织iNOS和NO含量及COX-2的表达均显著升高和上调（0.01）电针可以降低结肠组织iNOS和NO含量及COX-2的表达（0.01）。结论:电针对肠道神经系统的调整作用可能是其改善抑郁状态下大鼠消化功能的一个重要途径。 【关键词】 抑郁症.针灸疗法大鼠周围神经胃肠系统电针疗法 抑郁症是指一种以情绪显著而持久低落为主要特征的综合征，消化功能障碍作为抑郁发作期间出现的主要躯体症状，严重损害着病人的生活质量。大量研究发现，抑郁情绪作用于中枢神经系统，并通过脑肠轴影响胃肠活动［1］ ，但是对于它对肠道神经系统的作用机制却研究不多。临床上电针对抑郁症和消化功能障碍疗效颇佳，且具有起效快、副作用小的优势。故本实验通过观察电针对慢性应激抑郁模型大鼠肠道神经系统的神经递质iNOS和NO的含量及其对COX-2的表达水平的影响来探讨电针改善抑郁症消化功能障碍的机理。 　　 1 材料与方法 　　 1.1 材料 1.1.1 主要试剂与仪器 HANSLH202型电针仪1寸28号华佗牌毫针NOS分型试剂盒和NO检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）羊抗鼠COX-2单克隆抗体（美国Santa Cruz生物化学有限公司）SP超敏试剂盒（福州迈新生物技术开发有限公司）DAB显色剂（北京中山公司）。 1.1.2 动物分组与模型制作 健康雄性SD大鼠（由维通利华实验动物技术有限公司提供，清洁级），体重160～180g，30只。每笼4只，自由饮食，自然光线，适应性喂养1周。然后随机分为3组:正常组、模型组和电针组，每组10只。除正常组正常喂养外，其余大鼠适应性喂养后运用慢性应激结合孤养的方法造模［2］ 。慢性多种应激程序每日随机安排以下一种:断食24h，断水24h，昼夜颠倒24h，夹尾3min，束缚3h，10℃冷水游泳5min，电击足底（电压为30V，电击5s，间歇5s，共进行300s），每种刺激3次，共21d。 1.2 方法 1.2.1 电针方法 参照大鼠选穴图谱，选取天枢、百会和印堂穴。使用HANSLH202型电针仪，电针频率为2Hz，电流强度1-3mA，每次30min，每日9.00Am1次。电针组造模同时给予治疗，共21d。 1.2.2 iNOS和NO的测定 实验完成后，快速断头处死大鼠，打开腹腔，取适量结肠组织，在冰冷的生理盐水中漂洗，除去血液，快速滤纸吸干，称重，用生理盐水作为匀浆介质制备成10%的组织匀浆，低温离心机3000r.min离心15min，取上清，iNOS和NO的检测按照相应的试剂盒说明书进行。 COX-2表达的检测:在距肛门约7cm处取结肠组织1cm，用体积分数10%的福尔马林溶液固定，固定好的标本，常规石蜡包埋切片，采用免疫组化SP法检测COX-2的表达。操作按照试剂盒说明进行，一抗工作浓度为1:80，DAB染色，苏木素套染，以PBS代替一抗作阴性对照，以细胞核蓝色为阴性，胞浆内或核膜上呈棕黄色为阳性。每张切片选取5个400倍视野，采用IPP全自动图像分析软件，Olymps摄像系统测定阳性反应物灰度值并照片。 1.3 统计学处理方法 实验数据以ˉx±s表示。用单因素方差分析，继以Dunnet双侧检验进行统计处理，分析组间差异，以0.05作为差异显著性标准。 【摘要】 目的:探讨电针改善抑郁症引起的消化功能障碍的机制。方法:将30只Sprague Dawley雄性大鼠随机分为正常组、抑郁模型组、电针组，每组10只。采用生物化学试剂盒检测大鼠结肠组织中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、一氧化氮（NO）的含量，免疫组化SP法检测结肠组织环氧合酶-2（COX-2）的表达。结果:与正常组比较，慢性应激使模型组大鼠结肠组织iNOS和NO含量及COX-2的表达均显著升高和上调（0.01）电针可以降低结肠组织iNOS和NO含量及COX-2的表达（0.01）。结论:电针对肠道神经系统的调整作用可能是其改善抑郁状态下大鼠消化功能的一个重要途径。 【关键词】 抑郁症.针灸疗法大鼠周围神经胃肠系统电针疗法 抑郁症是指一种以情绪显著而持久低落为主要特征的综合征，消化功能障碍作为抑郁发作期间出现的主要躯体症状，严重损害着病人的生活质量。大量研究发现，抑郁情绪作用于中枢神经系统，并通过脑肠轴影响胃肠活