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益气化淤中药对大鼠胃癌前病变蛋白激酶C蛋白表达的影响_药学论文
益气化淤中药对大鼠胃癌前病变蛋白激酶C蛋白表达的影响_药学论文
【摘要】 目的观察益气化淤中药对大鼠胃癌前病变胃黏膜蛋白激酶C(PKC)表达的影响。方法采用MNNG、乙醇、饥饱失常等多因素造模。造模型成功后,将造模存活大鼠随机分为自然恢复组,中药高、中、低剂量组, 各组大鼠作相应的处理后, 免疫组化法检测各组大鼠胃黏膜组织PKC表达水平。结果各治疗组PKC表达较自然恢复组下调,有显著性差异(0.05)。结论益气化瘀中药可能是下调PKC的表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,而发挥对大鼠胃癌前病变的治疗作用。
【关键词】 胃癌前病变 蛋白激酶C 益气化淤中药
Abstract:ObjectiveTo observe the effect of Yiqi Huayu Recipe on the expression of protein kinase C(PKC) in rats with gastric precancerous lesions(GPL).MethodsThe model of GPL was established mainly through N-methyl-N-nitro N-nitrosoguanidine (MNNG) together with other factors including alcohol stimulation and undue hunger and overeating. The survived rats after modeling were randomly divided into spontaneous recovery, and high-, moderate-and low-dose of Yiqi Huayu Recipe group. After the corresponding treatment, the expression of PKC was detected by immunohistochemical method. ResultsThe expression of PKC in each treatment group were distinctly lower than that in spontaneous recovery group (0.05).ConclusionYiqi Huayu Recipe is effective in the treatment of rats with GPL by inhibiting the expression of PKC.
Key words:Gastric precancerous lesions; Protein kinase C; Yiqi Huayu Recipe
慢性萎缩性胃炎(CAG)伴中重度不典型增生或/和不完全性结肠型化生是胃癌的重要癌前病变。益气化淤中药临床治疗胃癌前病变取得了很好的治疗效果[1],为了探讨其作用机制,特设计本实验,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 药物及试剂
甲硝基亚硝基胍(MNNG)为Fluka公司产品,每周用双蒸水配成1 g/L的母液4℃避光储存,临用时用双蒸水配成所需浓度;脱氧胆酸钠购自湖北省医药公司;雷尼替丁由杭州赛诺菲圣德拉堡民生制药有限公司生产;PKC小鼠抗大鼠单克隆抗体为SantaGruz 公司产品;生物素化山羊抗小鼠IgG(二抗)、辣根酶标记链亲合素(三抗)、DAB、封闭用山羊血清等为博士德试剂公司产品。益气化淤中药主要由太子参、石斛、三七、郁金、白花蛇舌草等组成,浓度2 g/ml。
1.2 造模及给药方法
选用SPF级6周龄SD♂大鼠62只,体质量100~120 g。造模参照严茂祥等[2~6]综合造模方法并加以改进。大鼠自购进后适应性喂养1 d。从62只大鼠中随机抽取13只作为正常组, 其余49只用于造模。正常组大鼠不做任何处理;造模大鼠每日自由饮用100 mg/L MNNG液(饮料瓶用油漆涂黑避光)、进食含0.3 g/L雷尼替丁的纯鼠饲料、上午用56℃ 150 g/L的氯化钠液按10 ml/kg灌胃,进食2 d,禁食1 d,进食当天下午用8.5 g/L脱氧胆酸钠溶液按10 ml/kg灌胃。禁食当天下午用400 ml/L乙醇按10 ml/kg灌胃,连续24周。24周末时随机抽取正常组和造模大鼠各1只,杀检,观察组织病理学变化(以HE染色光学显微镜下观察的结果为主),确认模型是否成功。
造模型成功后,将造模存活的48只大鼠随机分为自然恢复组12只。中药高、中、低剂量组(简称高、中、低剂量组)各12只。高剂量组每日每只按20 g/k
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