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高中生物人教版选修3《基因工程的基本操作程序》课件.ppt
将目的基因导入受体细胞(动物细胞) 显微注射法 (四)目的基因的检测与鉴定 ——检查是否成功 检测— 鉴定—— ①检测转基因生物染色体的DNA 上是否插入了目的基因 ②检测目的基因是否转录出了mRNA ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 方法—— 方法—— 方法—— DNA分子杂交 分子杂交(注意与上不同之处) 抗原抗体杂交 DNA分子杂交示意图 采用一定的技术手段,将两种生物的DNA分子的单链放在一起,如果这两个单链具有互补的碱基序列,那么,互补的碱基序列就会结合在一起,形成杂合双链区;在没有互补碱基序列的部位,仍然是两条游离的单链。 P15思考与探究 1)有关基因工程的叙述中,错误的是( ) A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶 A 练习 2)有关基因工程的叙述正确的是 ( ) A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 D 练习 3)基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是 ( ) A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达 C 练习 1.2 基因工程的基本操作程序 补:原核细胞的基因结构 非编码区 非编码区 编码区 编码区上游 编码区下游 与RNA聚合酶结合位点 启动子 终止子 RNA聚合酶能够识别调控序列中的结合位点,并与其结合。 转录开始后,RNA聚合酶沿DNA分子移动,并以DNA分子的一条链为模板合成RNA。 转录完毕后,RNA链释放出来,紧接着RNA聚合酶也从DNA模板链上脱落下来。 ①不能转录为信使RNA,不能 编码蛋白质。 :能转录相应的信使RNA,能 编码蛋白质 编码区 非编码区 原核细胞的 基因结构 ②有调控遗传信息表达的核 苷酸序列,在该序列中, 最重要的是位于编码区上 游的RNA聚合酶结合位点。 启动子 补:真核细胞的基因结构 编码区 非编码区 非编码区 与RNA聚合酶 结合位点 内含子 外显子 能够编码蛋白质的序列叫做外显子 不能够编码蛋白质的序列叫做内含子 启动子 终止子 编码区上游 编码区下游 内含子: 外显子: 真核细胞的 基因结构 编码区 非编码区 外显子:能编码蛋白质的序列 内含子:不能编码蛋白质的序列 :有调控作用的核苷酸序列, 包括位于编码区上游的RNA 聚合酶结合位点。 非编码序列: 包括非编码区和内含子 原核细胞 真核细胞 不同点 编码区是 _____的 编码区是间隔的、_____的 相同点 都由能够编码蛋白质的______和具有调控作用的______区组成的 原核细胞与真核细胞的基因结构比较 思考 编码相同数目氨基酸的蛋白质,原核细胞与真核细胞基因结构一样长吗? 连续 不连续 编码区 非编码 基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 一、目的基因的获取 1、目的基因:主要是指 编码蛋白质的基因 也可以是: 3、获取目的基因的常用方法有哪些? (1)从基因文库中获取 (2)利用PCR技术扩增 (3)人工合成 请阅读P9第一和二两段 一些具有调控作用的因子 (1)从自然界中已有物种中分离出来 (2)用人工方法合成 2、途径 (一)从基因文库中获取目的基因 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断,导入到受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库 基因文库 基因组文库 部分基因文库 (如:cDNA文库) 1.基因文库 基因组文库与部分基因文库的关系 怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因呢? ③怎样从基因文库中找到我们所需要的目的基因 根据目的基因的有关信息,例如,根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA,以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。 基因文库的建立方法 提取某种生物的全部DNA 用适
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