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* * * * * * * * * * * * * * * * * 返回本节 (3)砂土管保藏法 利用土壤颗粒对微生物起保护作用,提高微生物的存活率。其包括砂土制备和真空抽干两步。 适用菌种:产孢子的微生物,对于一些对干燥敏感的细菌(奈氏球菌、弧菌、假单胞杆菌)以及酵母不适用。 (4)真空冷冻干燥法 先在菌悬液加入保护剂(如:脱脂牛奶、血清等)然后在较低温度下使成冻结状态,最后减压抽干。 特点: 它是菌种保藏中最有效的一种方法。保存期可达一年至数十年之久,并且存活率高,变异率低。单使手续麻烦,需要一定的设备。 适用菌种:对于不长孢子或长的很少孢子的真菌保藏效果不佳。 (5)其他保藏方法 冷冻法:分低温冷冻(-20 ℃)与超低温冷冻(-196 ℃)两种。适用于细菌、真菌、病毒等的保藏 液态真空干燥法:菌体在恒温液态条件下进行真空干燥。适用于包括细菌、病毒,特别适用于冷冻干燥保藏效果不佳的菌种。 琼脂穿刺封口保藏法:适用于不产孢子细菌的保藏 曲法保藏:将麸皮与水按比例混合,灭菌后接入菌种,待孢子长成后即为成曲。将试管放入盛有氯化钙的干燥器中,干燥后低温保藏。适用于有大量孢子的霉菌和某些放线菌的保藏。 麦粒保藏法:麦粒灭菌后接入菌液,培养有菌丝或孢子时,置通风、避光、干燥处保藏。适用于一些放线菌、芽孢杆菌、酵母的保藏。 无水硅胶保藏法:将细胞悬浮液和等体积的脱脂灭菌牛奶混匀,加入装有无水硅胶的试管中,然后将试管放于干燥器内,室温或4 ℃保藏。对于细菌和真菌效果都较好。 9、基因工程菌的保藏 由载体质粒等携带的外源DNA片段通常是遗传不稳定的、且很易丢失其外源质粒复制子。质粒基因通常为宿主细胞生长非必需。 一般情况下当细胞丢失这些质粒时,生长速度会加快。 当培养基中加入抗生素时,抗生素提供了一有利于携带质粒的细胞群体的极有用的生长选择压。而且在运用基因工程菌进行发酵时,抗生素的加入可帮助维持质粒复制与染色体复制的协调。 我们建议基因工程菌应保藏在含低浓度选择剂的培养基中。 国内外菌种保藏机构 菌种是一个国家的重要资源,世界各国对菌种的保藏都极为重视。世界上有700多家菌菌种保藏机构,其中国际知识产权组织承认的法定的保藏机构仅有28家。 1、我国的微生物菌种保藏机构 1)普通微生物菌种保藏管理中心(CCGMC) 中科院微生物所,北京, 中科院武汉病毒研究所 2)农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC) 中国农业科学院土壤肥料研究所,北京 (ISF) 3)工业微生物菌种保藏管理中心(CICC) 中国食品发酵工业科学研究院,北京,(IFFI) 4)医学微生物菌种保藏管理中心(CMCC) 中国医学科学院皮肤病研究所,南京 卫生部药品生物制品检定所,北京 中国医学科学院病毒研究所 5)抗生素菌种保藏管理中心(CACC) 中国医学科学学院抗生素研究所,北京 四川抗生素工业研究所,成都 华北制药厂抗生素研究所,石家庄 6)兽医微生物菌种保藏管理中心(CVCC) 农业部兽医药品检察所,北京 2、国外主要的微生物菌种保藏机构 1)美国标准菌种收藏所(ATCC) 2)美国冷泉港研究所(CSH) 3)日本东京大学应用微生物研究所(IAM) 4)日本东京科研化学有限公司(KCC) 5)日本大阪发酵研究所(IFO) 6)英国国立标准菌种收藏所(NCTC) 7)美国国立卫生研究所(NIH) 8)美国农业部北方开发利用研究部(NRRL) ?? 2010年7月6日消息,加拿大奎尔夫大学教授 T. Ryan Gregory将大肠杆菌培养皿中的细菌能够“幻化”成骷髅形状。 * * * * * * * * * * * * * 异丙嗪的镇静作用 Promethazine异丙嗪(抗过敏药) Chlorpromazine 氯丙嗪(安定) Thiazinamium 噻丙胺(支气管扩张) 磺胺家族的发展 单氨氧化酶抑制剂的发现 格鲁米特的芳构酶抑制作用 筛选发现先导物 随机与非随机筛选 Random/nonrandom screening 高通量筛选 High-throughput screening (HTS) 虚拟筛选 Virtual screening Virtual screening 用计算机筛选的方法称为虚拟筛选,或称in silico筛选 ,成为in silico-in vitro-in vivo模式 。 用一系列“基于知识的滤片”对虚拟库“筛选”,以“浓缩”出能够满足预定标准的化合物。 这些滤片包括类药性(drug like),药代动力学性质,毒性,知识产权问题以及与受体的互补性或与配体的相似性等,是通过数据库搜寻和计算化学实现的。 Virtual screen
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