生物工艺学复习题.docVIP

第一讲 概论 至今生物技术的发展史上经历了三个浪潮，分别是 什么是工业生物技术？ 什么是生物炼制？ 4、工业生物技术重大产品系列包括哪些？ 第二讲 发酵概论 次级代谢产物包括大多数的抗生素、生物碱和微生物毒素等物质。它们的发酵属于生长与产物非偶联的类型，一般分为菌体生长、产物合成和菌体自溶３个阶段。 发酵的定义？ 原本指在厌氧条件下葡萄糖通过酵解途径生成乳酸或乙醇等的分解代谢过程。 现在从广义将发酵看作是微生物把一些原料养分在合适的发酵条件下经特定的代谢转变成所需产物的过程。 有氧发酵与厌氧发酵的区别？介绍的产品中哪些是有氧发酵？哪些是厌氧发酵？ 发酵过程中菌体生长的阶段？ 分批发酵、补料分批发酵、连续发酵？ 分批发酵 分批发酵的优缺点：§操作简单、周期短 §染菌的机会减少 §生产过程、产品质量易掌握 §不适用于测定过程动力学 §对基质浓度敏感的产物，用分批发酵不合适 补料分批发酵 补料分批发酵与传统分批发酵相比，其优点在于使发酵系统中维持很低的基质浓度。低基质浓度的优点： 1）可解除底物抑制，产物的反馈抑制和快速利用碳源的阻遏效应，并维持适当的菌体浓度，使不致于加剧供氧的矛盾； 2）可降低培养基的黏度，并尽可能地延长产物的形成时间。 3）避免培养基积累有毒代谢物。 与连续发酵相比，补料分批发酵不需要严格的无菌条件，也不会产生菌种老化和变异等问题。 工业发酵的一般流程是什么？ 生物发酵工艺多种多样，但基本上包括菌种的选育、菌种培养基的配制、扩大培养 和接种、发酵过程，下游处理即分离提纯等几个过程。 第三讲 工业微生物 常用的发酵工业微生物有哪些？ 发酵工业微生物：原生生物界及非细胞型微生物（病毒、噬菌体），主要是细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、噬菌体、藻类等 发酵工业对生产菌种的要求？ 产率高 原料要易得、价廉 发酵条件粗放 菌种生长和发酵速度较快，发酵周期短：感染杂菌的机会减少，提高设备的利用率 尽量诱变次数少，避免选择缺陷型 菌种纯粹，稳定性好 菌种退化，生产性能下降是生产中常碰到的问题。 抗杂菌能力强，如抗噬菌体 不是病原菌，不产生有害物质和毒素 使用新菌种时更应注意；应用食品领域更需经严格鉴定，早期酱油生产采用黄曲霉，现已停止 如何筛选出生产目标产品的菌株？菌株筛选的两个关键问题？ 1．定方案 – 采样 – 增殖 – 分离 – 发酵性能测定 2．菌种纯种分离技术 平板划线分离法 简单平板分离法 稀释分离法 涂布分离法 毛细管分离法 小滴分离法 随机筛选方法： 菌种经诱变处理后,进行平板分离,随机挑选单菌落,从中筛选高产菌株。为了提高筛选效率，发展了一些快速筛选方法（包括摇瓶筛选法，琼脂块筛选法等），并归纳出筛选高产菌的培养基选择准则: 　 1、制备一系列含有各种类型营养成分（生长限制因素）培养基； 　2、避免使用容易同化的碳源或氮源，（引起分解代谢物阻遏）； 　 3、加入缓冲液以减少pH的变化； 　 4、确定含有所需的辅助因子。 理性化筛选 生长因子产生菌（对应于营养缺陷型）的筛选： 通过观察分离菌能否促进营养缺陷型（auxotroph）的生长，便可检出生长因子产生菌。 抗反馈突变株（抗结构类似物）的筛选 ： 结构类似物具有和代谢产物相似的反馈调节作用，但又不同于代谢物，不具有正常的生理功能，对细胞代谢又阻碍作用。由于突破了原有的反馈调节系统，这些突变株就可以产生大量的该种代谢物? 高通量筛选。 高通量筛选（high throughput screening):将许多模型固定在各自不同的载体上，用机器人加样，培养后用计算机记录结果，并进行分析，使筛选从繁重的劳动中解脱出来，实现大规模筛选。 “分离什么和从哪里分离出所需微生物?” 2、“如何筛选分离出所需微生物?” 什么是诱变育种？菌种诱变育种的方法？ 诱变育种：通过物理或化学等诱变剂的处理，使诱变对象细胞内的遗传物质发生变化 按照生产的要求，根据生物的遗传和变异的理论，用人工的方法造成菌种变异，再经过筛选、而达到菌种诱变选育的目的。 诱变育种一般采用物理、化学诱变剂使微生物DNA的碱基排列发生变化，以使排列错误的DNA模板形成异常的遗转信息，造成某些蛋白结构变异，而使细胞功能发生改变。物理诱变剂：射线如紫外线、X-射线、γ-射线，快中子,等离子体，超高静压 化学因子如碱基类似物、5—氟尿嘧啶、烷化剂等 什么是菌种保藏？方法有哪些？ 保藏的原理：根据菌种的生理、生化特点，人为地创造条件，使菌种的代谢活动处于不活泼状态。首先挑选优良纯种，最好是休眠体（孢子、芽孢）；其次要创造一个最有利于休眠的环境条件，降低其代谢活动，延长