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SPE技术在环境监测中的应用 固相萃取-高效液相色谱法检测水中的酚类物质 （一）主要仪器与试剂 Agilent 1200型高效液相色谱仪，配DAD检测器(美国Agilent仪器有限公司)； ENVI一18型固相萃取柱(500 mg)(美国SUPELCO公司); 2 000 mg／L酚类化合物标准储备液; 乙腈、异丙醇、甲醇、乙酸乙酯、二氯甲烷，磷酸、盐酸，超纯水. （二）样品前处理????? 取1 000 mL水样，用6 mol／L盐酸溶液调节pH值为2．0～3．5，再用乙酸乙酯／二氯甲烷混合溶剂(体积比为1：1)以10 mL／min的流量过萃取柱。 1.活化：反相固相萃取柱(萃取柱使用前分别用甲醇和超纯水活化)。 2.上样：将水样以5 mL／min～10 mL／min的流量过固相 萃取柱富集浓缩。 3.淋洗：装样完毕，用10 mL乙酸乙酯淋洗，以净化样品。 4.洗脱：待固相萃取柱吹干后，用10 mL二氯甲烷洗脱，收集洗脱液 5.浓缩：用旋转蒸发仪浓缩至1．0 mL进行色谱分析。 （三）色谱条件 色谱柱:?SB-C18 (4．6 mm × 150 mm ×5．0 lxm)； 柱温:30℃ ； 波长:287 nm； 流动相组成：A为乙腈，B为0．01 mol／L磷酸溶液，按(20％ A+80％ B)7．5 min，(45％ A +55％ B)9．5 min，(80％ A+20％ B)15 min梯度设置 ； 流动相流量:1．0 mL／min； 进样体积:20 uL。 （四）标准曲线的绘制 ??????? 在室温下，用异丙醇将酚类化合物标准储备液逐级稀释成0 mg／L、10．0 mg／L、16．0 mg／L、20．0 mg／L、30．0 mg／L、40．0 mg／L标准溶液系列，在上述色谱条件下分析，以峰面积为纵坐标、质量浓度为横坐标绘制工作曲线。 （一）色谱条件的选择 ????? 用乙腈和水作流动相，14种酚类化合物不能很好分离，而且峰拖尾严重，这是由于酚羟基易产生电离，在固定相表面有双重保留机制。改用乙腈和0.01 mol／L磷酸溶液作流动相，可抑制酚的电离，成为中性分子在反相条件下的疏水缔合物，使分离效果和峰形得到改善。只有在梯度条件下，才能使14种酚类化合物达到基线分离 。按试验中的梯度条件设置，分离效果最佳 。波长为287 nm时，峰的分离效果最好。该试验选择287 nm为检测波长。 ? 水样的组成十分复杂，除了酚类化合物外，还含有大量在紫外光区有吸收的其他物质，如芳胺、芳烃、多环芳烃等，这些物质可能会与酚类化合物出峰时间相同，干扰测定。水样中的酚类化合物需分离和富集后才能测定，但酚类化合物与其他有机物难以预分离。根据酚类物质在弱酸性条件下以中性分子形态存在、疏水性强、在反相柱上有保留的特点，在富集时将水样pH值调节至2．0～3．5。尝试用不同的洗脱剂(乙腈、四氢呋喃、乙酸乙酯、二氯甲烷)洗脱小柱上的酚类化合物，发现用10 mL乙酸乙酯和二氯甲烷能完全洗脱 。 （三）方法的精密度和回收率 　在选定的色谱条件下对水样进行测定,同时进行添加回收实验.取7份水样各1000mL，用6 mol／L盐酸溶液调节pH值为2．0～3．5，6份用该方法平行测定，1份加标10.0m/ug，计算回收率。 加标回收率= (加标试样测定值－试样测定值)÷加标量×100%. 个人体会： 发展前景： 固相萃取技术与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率，更有效的将分析物与干扰组分分离，减少样品预处理过程，操作简单、省时、省力。 。固相萃取预处理方法在医药、食品、环境、商检、化工等领域将会有良好的应用与发展。 参考文献： 史坚．固相萃取高效液相色谱法测定废水中苯酚和间甲酚[J]．环境监测管理与技术，2000，12(6)：35—36． 张丽，李楠，万延延固相萃取一高效液相色谱法测定饮用水中酚类化合物，连云港市环境监测中心站，江苏 连云港222001 胡秋芬，杨光宇，黄章杰，等．固相萃取一高效液相色谱法测定水中酚类物质[J]．分析化学，2002，30(5)：560—563． 张呖，管春梅，陈文华，等．高效液相色谱法测定水中酚类化合物[J]．中国卫生检验杂志，2003，15(4)：196—197． 王浩，刘艳琴，曹红，杨红梅，刘小力，闫龙宝 固相萃取与高效液相色谱联用测定宠物食品中三聚氰胺国家食品安全监督检验中心,北京100083 薛风丽，李岩，杨瑞强，等．SPME—HPLC法测定水中的酚类化合物[J]．中国给水排水，2006，22(16)：81—83． * ? 酚类化合物广泛存在于环境中，是造成环境污染的重要工业化学品，我国饮用水卫生标准规定挥发酚的质量浓度0.00