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药物血浆半衰期的测定(药本2010).ppt
* 实验12 药物血浆半衰期的测定 【目的和原理】 绝大多数药物在体内按一级动力学的规律消除,如以药物血浓度的对数值为纵座标,时间为横座标,其时量关系呈一直线,该直线的方程式为logCt= logC0-Kt/2.303,因此如按給药后各时间测出的血药浓度数据在对数座标纸上作点,顺着各点的分布趋势作一回归直线, 由回归直线上任意两点的座标算出斜率B,再根据B= -K/2.303求出K值,通过t1/2=0.693/K可算出t1/2值,此外也可通过作图法直接查出t1/2值。对氨基水杨酸钠可与FeCl3生成一络合物呈紫红色。该络合物在波长525nm下比色,其光密度(OD)与对氨基水杨酸钠浓度成正比。本实验以对氨基水杨酸钠为例,学习测定药物血浆半衰期(t1/2)的基本方法并思考其实际应用的意义。 【实验步骤及观察项目】 (1)取试管5支编号,各管加入生理盐水4ml。 (2)取小白鼠一只称重,用棉签涂少许肝素液于小白鼠右眼眶及反应皿内抗凝,再用取血针头从眼眶取血50ul加入1号管中作为药前管。 (3)小白鼠ip10%对氨基水杨酸钠溶液0.1ml/10g。 (4)给药后20min、40min、60min、80min后,分别从眼眶取血50ul,加入各相应试管中,摇匀,静置,记录取血的准确时间。 (5)各试管离心5min(2000~3000转/min),精确吸取上清液3ml分别放入另一编号试管中,每管加10%FeCl30.2ml摇匀显色。 (6)在分光光度计525nm波长下以0号管调零,测定各管的光密度值(OD)。 (7)各药后管的OD值减去药前OD值后,用直线回归方程Y=a+bX求出各时间的血药浓度值,数据按实验指导处理或用计算机计算t1/2值。 表7-8 对氨基水杨酸钠血药浓度测定步骤 管号 0 1 2 3 4 5 (药前) 取血时间 空白 0 20min 40min 60min 80min NS(ml) 3 4 4 4 4 4 血样(μl) - 50 50 50 50 50 充分摇匀,离心5min,取上清液 上清液(ml) - 3 3 3 3 3 10%FeCl3(ml) 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 摇匀后,用分光光度计比色测定OD525值 [数据处理] 按下表及公式处理结果,计算t1/2值。 管号 T(时间) C(浓度) logC TlogC T2 2 3 4 5 ∑ (∑T)2= ∑T·∑logC= n= ∑(TlogC)= *
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