研究生分生-基因调控.ppt

第一讲基因表达与基因表达调控 第一节 基因表达的过程和特点 第二节 环境对基因表达的影响 第三节 原核生物基因表达的调控 第四节 真核生物基因表达的调控 第五节 基因表达调控异常与疾病 第一节 基因表达的过程和特点 一、基因的转录—RNA的合成 二、蛋白质的生物合成—翻译 Transcription （三）转录后加工 2. 真核生物mRNA的转录后加工 ●RNA编辑 （RNA editing） 成熟mRNA＋蛋白质→细胞核→细胞质 二、蛋白质的生物合成——翻译 （二）翻译的基本过程 （三）肽链翻译后的加工修饰 (四)蛋白质的分拣与转运 ● 翻译转运同步（如多数分泌性蛋白） ● 翻译后转运（如核DNA编码的线粒体蛋白） 第二节 环境对基因表达的影响 一、外环境因素对基因表达的影响 ● 原核生物基因表达 ● 环境压力形成了特殊的表达方式 ●该表达方式对环境有高度适应性应变能力 ● 乳糖操纵子 ●真核生物基因表达 二、基因表达的时空调控 第三节 原核生物基因表达的调控 调节层次 ●翻译调节 三、翻译水平的调控 ● 5’ 端帽子： 保持mRNA稳定，提高翻译的效率 ● 3’ 端尾巴： poly(A)和蛋白多聚体形成的复合物 ● 去稳定元件： 引起RNA降解 ● 小干扰RNA： 双链，特异性降解靶mRNA ●影响翻译起始的因素 ● 微RNA（microRNA, miRNA）： 抑制模板活性 ● mRNA非翻译区的二级结构： 影响翻译速率 ● mRNA元件与RNA结合蛋白的相互作用 ● 翻译起始因子的可逆磷酸化 第五节 基因表达调控异常与疾病 一、转录因子突变与疾病 转录因子突变 ↓ 基因表达异常 ↓ 先天发育异常 二、基因修饰改变与疾病 CpG岛甲基化减少 ↓ 原癌基因表达增高 ↓ 导致肿瘤 基因表达与表达调控一览图 Approaches to study gene expression Known gene (single gene) unknown gene(s) (-0mics) DNA Southern Blot Sequencing CH3-specific PCR Differential-display PCR RT-real time PCR RDA FISH ROMA RNA Northern Blot DNA Microarray (cDNA, Oligo) RPA DD Real-time PCR SSH SAGE Prot Western Blot 2DE/MALDI-TOF Immunohistochemistry Protein Chip Confocal MC FACS FRET Biocore （六）通过改变mRNA分子的稳定性 调控基因表达 意义：降解途径保证mRNA不在细胞中累积并避免合成过多的蛋白质。 不同真核基因的mRNA的降解速率大不相同。 暂时需要的基因产物：半衰期可能仅为几分钟、甚至几秒钟。 经常需要的基因产物：其mRNA 可在多代细胞中稳定存在。 真核细胞mRNA降解有两种途径，是由每种mRNA分子的序列所决定。 Poly(A)的逐渐短缩：最常见的途径 mRNA分子一旦进入细胞浆中，核酸外切酶会使Poly(A)末端逐步短缩，当剩下约30个A时，5?端发生脱帽，mRNA分子被迅速降解。 一些mRNA分子的3?UTR的特殊序列有助于特殊蛋白质的结合，增加或降低Poly(A)短缩的速度。 可将Poly(A)直接从mRNA分子上切除。这种切除也有赖于mRNA分子的3?UTR特殊序列可以被内切酶识别。 另一个途径始于特殊内切酶的作用 转铁蛋白受体(transferrin receptor, TfR) mRNA分子 3?UTR柄环（stem-loop）结构——铁反应元件(iron-response element，IRE)。 例如： IRE-BP对转铁蛋白受体mRNA稳定性的调节 低铁状态 转铁蛋白受体 mRNA 5’ 编码区 活化的IRE-BP 3’ Poly