白英提取液对Hela细胞凋亡及Fas／FasL基因表达的影响.pdfVIP

维普资讯 subjecteddrugs．TheresultshowedthatcompoundIhadthestrongestanti—tumoractivity，secondwaspanaxadiol，1IandⅢ hadthe sameandtheweakestantitumoractivity．Furthermore，theanti—tumoractivitiesofpanaxadio|fattyacidesterderi~atesshowedpositive correlationwithsubjects’concentrations，butnorelationshipwithmolecularweightoffattyacid． Keywords Panaxadiolfattyacidester；Anti—tumoractivity；Panaxadiol 白英提取液对 Hela细胞凋亡及 Fas／FasL 基因表达的影响 韦 星，李朝敢，农 嵩，朱晓莹，黄晓敏 (右江民族医学院生物化学与分子生物学教研室，广西百色533000) 摘要 目的：探讨 白英提取液对Hela细胞凋亡及 Fas／FasL基因表达的影响。方法 ：采用M1Tr法检测细胞增殖 抑制率，流式细胞仪检测凋亡，二步法免疫组化检测 Fas蛋白表达，半定量 RT—PCR检测 Fas和 FasLmRNA表达。 结果：白英提取液对 Hela细胞增殖有较强的抑制作用，且这种作用呈一定的剂量一时间依赖性；细胞凋亡率明显升 高；Fas基因mRNA和蛋白表达显著上升，FasLmRNA表达明显下降。结论 ：白英提取液通过上调Fas基因和下调 FasL基因表达，诱导细胞凋亡，从而抑制 Hela细胞增殖。 关键词：白英；Hela细胞；细胞凋亡；Fas；FasL 中图分类号：R285．5 文献标识码 ：A 文章编号：1001—4454(2006)l1—1203-04 白英 (Solanum lyratumThunb，SL)为茄科植 桥生物技术公司产品；KHBK 酶标仪(芬兰)；倒置 物，又称 白毛藤，临床常用于鼻咽癌、宫颈癌、肝癌、 显微镜(Gibco)；BX51型显微镜(Olympus)；PCR仪 肺癌、食道癌、胃癌等多种癌症治疗 ¨j。研究发现， (杭州郎基)。 白英脂溶性提取物能诱导肝癌 BEL-7404细胞凋 1．2 方 法 亡，但其作用机理尚未清楚 J。Fas／FasL系统是肿 1．2．1 白英水提取液的制备：取 白英(购于广西百 瘤细胞凋亡的重要途径之一。本研究通过体外细胞 色市中医院中药房，产地百色)干品50g，用500ml 培养，观察 白英提取液诱导人宫颈癌 Hela细胞凋亡 水浸泡 1h，加热煮沸后小火煎熬60min，室温冷却， 及 Fas／FasL基因表达变化的影响，初步探讨其抗癌 120目网筛过滤，弃药渣，滤液离心 (3，000rpm×20 作用的分子机制，为临床应用 白英预防和治疗宫颈 min)，同法再离心 1次。取上清液，浓缩至50ml，调 癌提供实验依据。 pH值为7．0—7．2，0．22 m过滤除菌，获生药含量为 1 材料和方法 1．0g／ml白英水提液，一20~C保存备用，实验时将含 1．1 材料 10％胎牛血清RPMI1640培养液稀释至所需的药物 1．1．1 细胞：人宫颈癌 Hela细胞株 由中科院上海 浓度。 细胞生物研究所细胞库提供。 1．2．2 细胞培养和药物处理：Hela细胞，以含 100 1．1．2 主要试剂与仪器：胎牛血清 (FBS)、RP— U／ml青霉素、100 g／ml链霉素、10％FBS的RPMI MI