农杆菌介导大豆遗传转化技术的研究进展.pdfVIP

第 29卷 第4期 大 豆 科 学 Vo1．29 No．4 20l0年 8月 S0YBEAN SCIENCE Aug． 2010 农杆菌介导大豆遗传转化技术的研究进展 于 洋，侯文胜，韩天富 (中国农业科学院 作物科学研究所 ，国家农作物基 因资源与基 因改 良重大科学工程 ，北京 100081) 摘 要：农杆菌介导是大豆遗传转化的主要手段。该文从受体基因型及外植体选择、菌株筛选及载体改造、标记基 因选用和添加剂应用等方面，介绍了近年来对农杆菌介导大豆遗传转化方法所做的改进，分析 了存在 问题，展望了 近期发展方向。 关键词 ：大豆 ；农杆菌介导 ；转基 因 中图分类号：$565．1 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000．9841(2010)04．0696—06 ApproachestoAgrobacterium ·mediated Transformation in Soybean YU Yang，HOU Wen—sheng，HAN Tian—fu (TheNationalKeyFacilityforCropGeneResourcesandGeneticImprovement(NFCR!)，InstituteofCropScience，TheChineseAcademyofAgricultural Sciences，Beijing100081，China) Abstract：Genetictransformationofsoybean(Glycinemax(L)Merr．)dependsmainlyonAgrobacteriummediationsystem． In thisreview，theauthorsintroduced themodificationsofthetechnicalproceduresin thissystem includingtheselectionof genotypes，explants，strainsandmakers，plasmidreconstruction，andapplicationofadditiveagents，etc．W eanalyzedthe disadvantagesofthissystem and tookalloutlookfortheimprovementofAgrobacterium—mediatedtransformationsystem insoy— bean in thenearfutureaswel1． Keywords：Soybean；Agrobacterium—mediated；Transformation 自1988年Hinchee等 和McCabe等 率先获 简称农杆菌)属于根瘤菌科、农杆菌属 ，在土壤中普 得转基因大豆植株 以来 ，转基 因技术逐步成为大豆 遍存在 ，其突出特点是可诱导大部分双子叶植物及 分子育种和基因功能研究 的重要手段 ，转基 因大豆 部分单子 叶植物产生冠瘿瘤。农杆菌 中决定冠瘿 品种选育和产业化取得了突破性进展 。目前，转基 瘤产生的质粒为 Ti质粒 ，天然的Ti质粒 由T—DNA 因大豆是应用面积最大的转基因作物 ，2009年种植 区、Vir区、Con区和 Ori区4部分组成。T—DNA两 面积达到 6．92×10hm ，占全球转基因作物种植面 端分别为左边界 (LB)和右边界 (RB)，大小均为 积的52％，占大豆种植面积的77％ 。 25bp。T。DNA区内有生长素合成基 因、细胞分裂素 与其它转基 因技术相 比，农杆菌介导遗传转化 合成基 因和冠瘿碱合成基 因，对冠瘿瘤形成起关键 系统具有拷贝数低、遗传稳定、基 因沉默现象少和 作用 ，而在进行植物遗传转化时，这些基 因将被去 成本低等优点，但农杆菌介导大豆遗传转化的频率 除，并