凝胶基片的制备与应用研究.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’() * ! +( *# 年 月 $%% !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 ,-./-01-2 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 凝胶基片的制备与应用研究 9 周升平 王欣荣 秦胜营 林志新 刘建华 （上海交通大学生命科学技术学院，上海 $%%$4% ） 摘 要 在 I 处理的玻片上交联聚丙烯酰胺凝胶层（ ），戊二醛活化。与末端氨基修 H@BE3,@)=B- !#00 J !#00 J $% 0 ! 饰的寡核苷酸片段共价结合制成芯片。这种芯片能够区分液相中序列不同的7K3 标记的目标核酸。与平面基片 相比，凝胶基片具有背景低、固定探针量高、杂交时间短的优点。将细胞因子 、 、 、 、 、 和 LM34 LM3# LM35 LM3; N+O L3% ’?O 的单克隆抗体加样于凝胶基片上制成蛋白质芯片，对乳腺癌患者和正常人的血清进行检测，发现乳腺癌患者 细胞因子 、 、 和 的表达量高于正常人的表达量，对临床诊断具有重要的参考意义。 LM34 LM3# L3% ’?O 关键词 聚丙烯酰胺凝胶，三维芯片，寡核苷酸微阵列，蛋白微阵列 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） P8! N !%%%3%5! $%% %#3%#;;3%# 基片的制备在生物芯片的研制中具有举足轻重 ! 材料与方法 的作用。基片的研制主要是围绕制作成本、探针固 定的密度、荧光背景以及应用前景开展工作。早期 ! ! 材料 的芯片是将核酸或蛋白固定在尼龙膜上，尼龙膜荧 玻璃片基（ ）购于 ;500 J $#00 J !00 O()E ,-=) 光背景较高表面多孔、具有渗透性，所需的试剂体积 公司。寡核苷酸片段由宝生物公司合成。7K3ET:U ［ ］ 较大。目前较常用的玻璃基片或硅基片! Q 4 虽然表 和H@BE3V@)=B- 来源于 UC=20=G@= H@(/-GC 公司。细胞 面无渗透性，样品消耗少，但是单位截面积的基片表 因子单克隆抗体由U-2W@B3-)0-2 公司王长城博士提 面所固定的探针量有限。 供。生 物 素 标 记 的 细 胞 因 子 抗 体 购 自