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利用实时荧光定量PCR技术检测转基因烟草.pdf
21 Vol. 21, No. 1 2005
1 NATURAL SCIENCES JOURNAL OF HARBIN NORMAL UNIVERSITY
PCR
刘冰峰 张延明 闫玉清 徐香玲
()
本实验通过荧光染料掺入 ds NA实时监控扩增产物的积累,根据质粒
标准品的 ct值制成标准 线, 结合标准 线方程可知未知样品的起始含量.该方法
灵敏度高快捷, 可用于基因突变和转基因植株的检测病毒的检测遗传疾病和肿瘤
疾病的诊断.
: 荧光定量 PCR; 扩增 线; 标准 线
tmi e fluorescence quantitation PCR) 1996
0 引言 ,
1983, .
,
[ 1] ,.
.
, , , PCR
, PCR,
., , ,
, . PCR
, , ,
,,
. .
.
PCR 1 实验材料
,, , 1. 1
PCR k358,
, HRP ( chitinase gene),
[2]
, , k358
., .
, mRNA 1. 2
. PCR pRAi 4b(R1000),
, PCR ( real- .
: 2004- 11- 04
70 2005
1. 3 2 实验方法
Taq NA polymerase PCR 2. 1 NA
. CTAB NA,
SYBR Green IM J. , 200~ 150 ng/L.
1. 4 2. 2 NA
( BECKMAN A llegra 21R, - 70 ! , 50
) mg/L, 50 mg/L YEB
(UNICAM HEIOS,) ,YEB
PCR ( PTC- 100GeneAmp PCR Sys , 28 ! , NA,
tem 9700 ) [3]
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