固定化酶载体——多孔壳聚糖微球的制备研究.pdfVIP

2009年5月 四川师范大学学报(自然科学版) May，2009 ofSiehuanNormal V01．32．No．3 第32卷第3期 Journal University(NaturalScience) 固定化酶载体——多孔壳聚糖微球的制备研究 马 骏， 宁光辉， 廖子夷， 赵仕林 (NJtl师范大学化学与材料科学学院，四川成都610066) 摘要：使用“反相悬浮·交联·低温冷却法”制备固定化酶载体——多孔壳聚糖微球．通过正交实验确定 了制备多孔壳聚糖微球的影响因素和最佳的实验条件．在最佳的实验条件制得的多孔壳聚糖微球平均粒径 小(34．57卜m)，粒度均匀(30．04-39．26“m占粒径分布的92％)，成球性好，表面成孔． 关键词：多孔壳聚糖微球；制备；正交实验 中图分类号：TQ316．33+5文献标识码：A 文章编号：1001．8395(2009)03-0339-04 doi：10．3969／j．issn．1001-8395．2009．03．016 0引言 苯为分散介质，环氧氯丙烷为交联剂，span80为乳 化剂，CCl4为制孔剂，乳化一交联后低温冷冻)克服 酶作为催化剂反应温和，无副反应，并且催化 了上述问题，制备的微米级多孔壳聚糖微球，成球 效率高、专一性强、活性可调，因而广泛应用于化 性好、粒径小、粒度分布均匀、表面成孔． 学、化工和生物制药等行业¨J．传统使用的天然酶 稳定性差，对高温、有机溶剂极其敏感、易失活、不 1实验部分 能重复使用，反应后混入产品，使产品纯化困难．而 1．1试剂壳聚糖(脱乙酰度95．62％，浙江金壳 固定化酶是通过物理或化学方法，将酶固定于载体 生物化学有限公司)；冰乙酸、无水乙醇、四氯化碳、 上，不仅保留了天然酶原有的特性，还克服了天然 环氧氯丙烷、甲苯、span80、氢氧化钠；所用试剂均为分 酶的缺陷，因而当今对固定酶的制备、应用的研究 析纯． 相当广泛而深入¨…． 固定化酶的载体与酶的稳定性、活性和酶载量 密不可分，所以很多人都努力寻找合适的固定化酶 载体．壳聚糖(聚-2．氨基．2．脱氧．D一13．1，4．葡萄糖) 技公司)；循环水式多用真空泵(SHB—B95A，郑州长 分子链上丰富的一NH：和一OH两种活泼的反应基 城科工贸有限公司)；低温恒温反应浴(DFY一10L／ 团，使其易于进行化学修饰，通过导入不同基团，可 40，巩义市予华仪器有限责任公司)． 将壳聚糖制备成多孔、有一定韧性的高分子微球， 1．3实验方法戊二醛交联壳聚糖的反应原理如 可作为固定化酶载体．壳聚糖因其原料易得，价格 图l所示．应用反相悬浮聚合技术，加入的制孔剂 低廉，机械性能较好，化学性能稳定，且具有可生物 CCl。在聚合形成微球的过程中占据一定的空间通 降解、固定化酶效率高等诸多优点而在固定化酶技 道，微球形成后，用无水乙醇洗去CCl。，即可使微球 术的发展中越来越受到人们的重视岬J．