双重调控的靶向性肿瘤增殖腺病毒的构建和抗肿瘤研究.pdfVIP

中国医药生物技宋论坛2嘲簪9胄青岛 结论使用可耐受的大剂量免疫抑制剂和AHST对小样本量的新诊断l型糖尿病患者进行 了治疗。进行娜T治疗后，除王名患者辨其他患者的叠细胞功能都升高，并且延长了大部 分患者不使用胰岛素治疗的时间。 骨髓来源和脑来源神经千细胞 移植治疗大鼠脑损伤的实验研究 伦鹏1孟庆海1姚维成1郭云良2金澎1 ’(1青岛大学医学院附属医院，2脑血管病研究所) 【摘要】謇的将骨髓来源和脑来源神经予细胞(潲Cs)移撬入大鼠脑损伤模型，毖较两秭细 胞移植治疗脑外伤的效果和临床应用价值。 方法分别在体磐培养骨髓来源和脑来源的Nses，待两组细胞多次传代并分别以№s专主觳、滔E、 变化。予移植后差0d和20d取鼠瞻进行免疫组他分析，魄较两种细胞在脑内的存活帮迁移情况，及 脑组织的修复情况。 结果两种来源黼es均可在移植区存活并离周重脑组织迁移，两组大鼠行为能力均有一定程度 恢复，且两组之间差别无显著性(P0．05)而与对照组差别有显著性(PO．05)。结论骨髓来源 能恢复。 ’【关键词】骨髓基质细胞，神经干细胞，移植，脑损伤 双重调控的靶向性肿瘤增殖腺病毒 的构建及抗肿瘤研究 琵晨宇滕理送 曹江 浙江大学医学院附属邵逸夫医院临床医学研究所浙江杭州3王∞16 背景和目的：利用腺病毒治疗肿瘤这一思路已经有了近百年的历史，尤其是近十年更是 褥到了飞速的发震。区别予以往单纯将腺病毒作为一种基因载体的方法，最近很多研究者都 Virus) 把目光集中在了靶向性肿瘤增殖病毒(Cancor—specificReplicatio”competent 中国医药生物技术协会 中国医药生物技术论坛 2007年9月青娲 上，霹对骤病毒进行转录调节修饰，使该瘫毒以高度熟特异性在毽鼗瓣癌中复裁并裂解瓣癌 细胞，而对正常的体细胞无杀伤作用。目前比较有效的～种修饰这类病毒的方法是将肿瘤细 熬疼特异性表达鲢寤动子／增强子插入到豫病毒某些必须基蠢的上游，替代腺病毒基霹霖有的 启动子，使经改造后的腺病毒只能在表达这些启动子／增强子的肿瘤细胞内增殖并最终裂解细 胞，麸嚣达到靶商治疗的蚕的。， 为探寻有效的肿瘤基因治疗方法，本研究正是基予以上思路，引入了两个在绝大多数肿 瘸缨麓孛均嵩表达焉在正常组织中低表达甚至不表达戆人端粒鹜罐纯亚单位妇雠 reverse telomerase 2，Cox-2)， 把这两者豹窟动子作势腺病毒麓增殖调控片断，分别调控腺病毒鲍嚣王a送秘嚣圭b区，使构建 后的腺病毒只能在MERT和Cox一2同时表达阳性的肿瘤细胞中特异性增殖，进而杀伤肿瘤细 胞，磊在正常体缨魏蠹复裁缺陷，具有高度的特异牲和安全性。 材料与方法：以腺病毒穿梭载体pd306(俞德超博士友情赠送)作为质粒载体，核查 鑫e曲鼹k，设计特异性萼|耪，通过踅嚣方法将魏TE嚣翥e◇x一2熬寤动子片段从人基目缀孛扩增 调控区，连接舞褥质粒遥过Pc翼、酶切、测序等方法进行鉴定。将擒建好的穿梭质粒载蒋与 2000转 染试裁≥，通过缨胞蠹羼漂重组，包装逛壶蠡零躲篁和eox一2启动子联合调控盼靶恕犍瓣瘤增 eox～2豹瓣瘤缨麓株巍均不表达蠡程勰和e溅一2的成纤维缨施，焉病毒增羞实验观察病毒 在细胞内的复制情况，用细胞生长抑制实验(MTT法)分析病毒对细胞的杀伤效果，用电镜 观察被感染缨蔻蠹大量复制的病毒颗粒，瘸瘸毒预感染瓣瘥缨胞再皮下接种予觐王b庇裸嚣和 Balb／c裸鼠皮下成瘸后直接瘤体内注射两种途径观察病毒在体内的