pH对黄鳝消化酶活性的影响研究.pdfVIP

长江大学学报(自科版)2005年 11月第2卷 第11期 ／农学卷 第25卷 第4期 JournalofYangtzeUniversity(NatSciEdit)Nov．2005Vo!．2No．11／AgriSciV，Vo1．25No．4 pH对黄鳝消化酶活性的影响研究 杨代勤，陈 芳，阮国良 (长江大学动物科学学院，湖北荆州434025) 严安生 (华中农业大学水产学院，湖北武汉430070) [摘要]研究了pH对黄鳝(Monopterusalbus)消化道 内蛋 白酶、胰蛋 白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性影响。结 果表明，pH会影响黄鳝消化道 内消化酶的活性，在 pH6．5～10．0范围内，随着 pH的升高，酶活性逐渐增 加 ．但 pH继续升高到一定值后 ，则会逐渐降低 。其蛋 白酶的适宜 pH为 8．5～9．0，胰蛋 白酶的适宜 pH为 8．0～8．5，淀粉酶的适宜pH为 7．O～8．0，脂肪酶的适宜 pH为 7．0～7．5。 [关键词]黄鳝(Monopterusalbus)；pH；消化酶活性 [中图分类号]Q959．482．06；Q48 [文献标识码]A [文章编号]1673—1409(2005)ll一0055一O3 消化酶的研究是鱼类营养生理和消化生理的重要研究内容，随着鱼类营养生理和消化生理学科的发 展，国内外对鱼类消化酶进行了大量的研究。近年国内主要对鱼类的消化道及消化腺的消化酶种类、消化 酶活性分布及环境因子对消化酶活性的影响进行了研究，研究对象包括我 国主要淡水养殖品种如鲢、 鳙_l1]、草鱼、鲤鱼、青鱼、鳜鱼[=j 以及海水养殖对象如对虾、皱纹盘鲍_7等 10多种水产动物。国外对鱼 类消化酶的研究起步较早，早期主要是研究消化酶在各消化器官组织 中的分布。随着渔业生产的发展和 科学技术的进步，对消化酶的研究也逐渐深入 。Kawai等对草鱼在不同食物饲喂下其肠道内麦芽糖酶、淀 粉酶和蛋 白酶的变化进行了研究，发现不同的食物会导致消化酶的变化_q]。Takii等研究了摄食后鳗鲡消 化道消化酶变化的动力学特性[1。 对于黄鳝的研究，目前大多数集中在性逆转、繁殖习性、组织观察等方面，并取得了一定的进展，但对 黄鳝消化器官内消化酶的研究报道很少，仅见白东清等对黄鳝肠道 的消化酶进行了初步研究L1。笔者研 究了pH对黄鳝 胃、前肠、后肠、肝脏消化酶的活性的影响，以期了解黄鳝消化酶的理化特性，现将结果报 道如下。 1 材料与方法 1．1 试验材料 试验用黄鳝 (Monopterusalbus)取 自长江大学动物科学学院黄鳝养殖基地，选取体质健壮、无病无 伤、大小基本一致 的个体 ，平均个体重 (42．8±3．5)g。 1．2 样品制备 将活鳝杀死，立即解剖，迅速取出所有内脏，置于冰块 中，分离出肠道，剪开肠道 ，将肠道等分为 2段， 取前肠用冰冻重蒸水冲洗肠内壁，经脱脂棉球轻轻擦拭干净后，刮下其粘膜。将每 5尾鱼的粘膜合并为一 个样品，每个样品设 3个重复。将获得的样品放入匀浆器中，低温下匀浆，匀浆液经 12000r／min离心 30 rain，所得上清液即为消化酶样品，置于冰箱中保存 ，24h内完成所有酶活性指标的测定。 1．3 pH梯度的设置 在 pH6．5～10．0的范围内，共设 8个 pH梯度值，即pH分别为 6．5、7．0、7．5、8．0、8．5、9．0、9．5、 10．0。 [收稿 日期12005—03—17 [基金项 目]教育部重点资助项目(03087)；湖北省 十五 重大科技攻关资助项目(2OO1AA2O1AO1) [第一作者简介]杨代勤(1966一)，男，湖北公安县人，农学博士，长江大学动物科学学院教授． 长江大学学报(自科版) 2005年 l1月 1．4 酶活性测定 (1)蛋白酶活性的测定 采用福林一酚试剂法 ]，用 722分光光度计于 680nm波长测其光密度值 。 蛋 白酶活性大小用 lg新鲜组织在 35℃、pH8．5条件下，每rain分解酪蛋白产生 l g酪氨酸定为一个活 性单位来表示(g／(g·rain))。 (2)胰蛋 白酶活性的测定 以Na--对甲苯磺酰一L一精氨酸 甲酯酸盐(TAME)作底物，先将29．0mg TAME和222mgCaC12溶于 i00mL0．05mol／L、pH9．0Tris—HC1缓冲液中，取 2个 比色池，分别加