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第 36卷第 7期 辽 　　宁 　　化 　　工 Vol. 36,No. 7 2007年 7 月 L iaon ing Chem ical Indu stry Ju ly, 2007 SD S - PA GE 电泳技术分析蛋白质的研究 1 1 1 2 1 高艳利 , 杨思文 , 樊凯奇 , 陈 　静 , 王 　娟 , ( 1. 沈阳化工学院 , 辽宁 沈阳 110 142; 　2. 东北大学 , 辽宁 沈阳 110004) 摘 　　　要 : 　SD S - PA GE是分析蛋白质的一项技术 ,重点介绍了其原理 、凝胶制备及染色方法 ,并对 ( ) 双向电泳 2 - D E 和电泳后蛋白质鉴定方法进行了简单的介绍 。 关 　键 　词 : 　SD S - PA GE; 蛋白质 ; 染色 中图分类号 : 　O 657　　文献标识码 : 　A 　　文章编号 : 　1004 0935 (2007) 07 0460 04 　　电泳是一种分离蛋白质和其他物质如核酸 、 还要根据被分离样品的相对分子质量大小设计相 嘌呤、嘧啶、一些有机化合物甚至无机离子的主要 应的浓度的胶 ; PG - PA GE 是按照凝胶孔径从上 方法或技术 。目前的电泳大多是在固定化的介质 至下不断减小的体系中 ,在电场力的推动下而移 中将样品放入流动相中进行分离 ,而不采用完全 动的不同大小的蛋白质分子会在不同位置明显受 自由态的溶液进行分离 。固体支持物的种类很 阻而形成极窄的区带 ,从而提高分辨率 。 多 ,如纸 、乙酸纤维素 、硅胶 、氧化铝 、琼脂糖 、淀粉 由于 SD S - PA GE 在测定蛋 白质分子量 、检 及聚丙烯酰胺凝胶等 。特别是聚丙酰胺凝胶 电 测特异蛋白、鉴定菌株种属 [ 2 ] 等方面具有操作简 泳 , 由于它是一种多孔胶 ,其凝胶孔径与蛋白质分 单 、重复性好等优点是其它技术无法比拟的 ,脉冲 子大小接近 ,提高了对蛋白质的分辨能力 。而且 SD S - PA GE 和微型 SD S - PA GE 缩短了电泳时 聚丙烯酰胺凝胶质胶方便 ,代价低 ,机械强度 、化 间 ,减少了传统 SD S - PA GE 因为电泳时间过长 学稳定性好 ,重复性强 ,对 pH 和温度变化稳定 , 而产生的副作用 ,而同位素标记和荧光标记技术 非特异吸附和电渗多很小 ,凝胶透明 ,易于显色并 的发展则提高了蛋白质的分辨率 ,使 SD S - PA FE 观察 。除此之外 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳与下一步 更具实效性 , 因此 SD S - PA GE 在许多实验室得 的蛋白质提纯和蛋白质鉴定方法如免疫印迹 、质 到广泛 的应用 。所 以本篇文 章主要 以 SD S— 谱鉴定等兼容性较好 , 因而使得聚丙烯酰胺凝胶 PA GE为研究对象进行简单综述 。 成为首选的蛋白质分离介质 [ 1 ] 。 1　SD S - PA GE 分离蛋 白质的基本 聚丙酰胺凝胶电泳有三种类型 ,等电聚焦 - 原理 聚丙酰胺凝胶 电泳 ( isoelectric focu sing po lyacryl SD S - PA GE 首次由 Shap iro 等提出后 , 已成 am id