不同获能培养液对猪精子体外获能效果的比较试验.pdfVIP

据 黼，’／叟j 杉之， 孳 广东畜牧兽医科技 1992年第 1期 9 不同获能培养液对猪精子体外获能效果的比较试验 ／ 雷 春 王祖昆’魏平华 王建忠 孔梅青 巫廷光 (广东省农科院畜牧研究所 ) - — — — — 一 ● — — — — 一 摘 要 2．1 猪鲜精精子的体外获能结果：见表l 本试验用精子穿透仓鼠卵的检测手段， 2．1．1 咖啡因对猪精子体外获能的作 用： 研究苯甲酸钠咖啡因、钙离 子 载 体A23187 受精6小时后，有52 的卵子 中有穿透 的精 (I—A23187)和肝素对猪精子体外获能 的 子头，而且可见到精子头部略有膨大。但继 效果．结果0．05rag／m1的肝素 与2mg／m1 续培养至22小时，精子穿透率无明显变化， 的咖啡因的协 同作用能有效地提高猪鲜精精 且精子头部膨大不显著． 子对去透明带仓鼠卵子的穿透率．同时，用 2．1．2 I—A23187对猪精子体外获 能 的作 此获能培养液在附睾冻精的体外获能试验， 用。受精6小时后可见精子穿入卵 子，延长 亦得出比对照组高的精子穿透率． 培养至26小时，穿入精子的脱尾现象明显， 关键词。猪精子、仓鼠卵子、体外获能 但精子头部膨大不显著。 材料和方法 2．1．3 肝素对猪精子体外获能的效果。受 1．1 材料 精21小时后，不仅可见卵子 内有穿透 的精子 1．1．1 猪鲜精液：本所猪研究室提供 头，穿入精子的脱尾现象显著，而且可见到 1．1．2 仓 鼠。广东省农科院兽医研究所提 精子头部膨大了一倍多，有的还有排列成环 供． 形 的染色体． 1．1．3 附睾冻精。本室 自制，解冻活力0．4。 2．1．4 对照：观察培养21小时后的卵子， 1．2 方法： 精子穿透率比以上各组明显较低。 1．2．1 仓 鼠的超数排卵及去透明带卵子 的 2．2 猪附睾冻精体外获能试验： 获得均按常规方法． 根据鲜精的试验结果，以咖啡因组作对 1．2．2 精子体外获能s取新鲜精液离 心三 照比较肝素对冻精体外获能的效果。经获能 次，用0．9％NaCI洗涤，除去精清并浓缩精 1．5小时受精2l小时后观察，对照组卵 子 有 液。然后用获能培养液以I：1的比例混合均 精子附着的较少，有精子穿透的更少，而肝 匀，浓度为1．74x10。个精子 ／m1，在37～ 素处理组的卵子有精子附着和穿透的较多， 39。C的CO 培养箱中获能培养1．5小时。 穿入 的精子头部膨大明显。效果见表2 1．2．3 受精：精子浓度为1x10。～1×l0 ／ m1，卵子与精子共同作用的时 间约6小时， ¨ 若继续培养，则先把卵子培养液洗涤后再培 3．1 咖啡因是一种小分子的嘌呤碱，能增 养。 强精子的代谢和活动力，使精子处于超活化 1．2．4 基础培养液为m--TCMI99液． 状态．这种超活化现象在体内也是以某种形 1．2．5 固定与染色l用戊二醛2．5％和福尔 式 参 与 受 精 的 (Yanagimachi