动物细胞培养精编学案.docVIP

第 2 周第 3 课时（2014年2月26日） 编制人：董波 2.2.1动物细胞培养预习案 教研组长 年级主任 教务主任 【学习目标】 简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 【学习重难点】 动物细胞培养的过程及条件 【复习提问】植物组织培养的概念、原理、过程方法、意义？ 植物体细胞杂交技术概念、原理、过程方法、意义？ 【预习新知】 1．为什么要进行动物细胞培养？ 2．什么是动物细胞培养？ 3．怎样进行动物细胞培养 4．进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶处理，说明细胞间的主要的物质是什么？用胃蛋白酶处理行么？如果用胰蛋白酶处理时间久了会不会真的把细胞消化掉？ 5．原代培养的时间段是什么？传代培养的时间段是什么？ 6．如果让你培养动物细胞，体外培养细胞时需要应该提供什么物质？需要什么样环境条件？ 7．为什么对动物细胞培养时候通常要加入血清，血浆？ 第 2 周第 3 课时（2014年2月26日） 编制人：董波 2.2.1动物细胞培养教学案 教研组长 年级主任 教务主任 【学习目标】 简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 【学习重难点】 动物细胞培养的过程及条件 【知识点】 一、动物细胞工程的常用手段 动物细胞工程的常用技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体生产，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。 二、动物细胞培养 1、概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 2、动物细胞培养的过程： 动物胚胎或幼龄动物的器官、组织→剪碎、胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理→单个细胞（分离细胞）→加培养液稀释，制成细胞悬液→原代培养（消化后的初次培养）→传代培养细胞株→细胞系（遗传物质改变） 3、相关概念： 原代培养：将组织取出，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，散成单个细胞，然后在细胞悬浮液中的初次培养的过程。 传代培养：把原代培养增殖的细胞定期用胰蛋白酶从瓶壁上脱离下来，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养的过程。 细胞株：传代培养的细胞能传到10—50代，这种传代细胞叫做细胞株。 细胞系：50代后，有部分细胞的遗传物质发生了改变，并且有癌变的特点，能无限地传代下去，这种传代细胞叫做细胞系。 4、特点：贴壁生长，接触抑制。 5、条件：（1）无菌、无毒的环境：培养液和培养用具进行无菌处理。 （2）营养：合成培养基的成分为糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清、血浆等。 （3）适宜的温度为36.5±5℃,pH为7.2—7.4。 （4）气体环境：空气95%、CO25%。 6、应用 （1）生产生物制品如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。 （2）应用于基因工程：动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞，离不开动物细胞培养。 （3）用于检测有毒物质。 （4）医学家培养各种正常的或病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据。 三、植物组织培养与动物细胞培养的比较： 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 培养原理 细胞全能性 细胞增殖 培养 基 物理性质 固体（加入琼脂） 液体 化学成分 营养物质（矿质元素、蔗糖、维生素）、激素 营养物质（葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素）、动物血清 培养材料 常用植物幼嫩的器官组织细胞或花药 常用动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 培养结果 可以培育成植株也可以获得大量细胞 培育成细胞株或细胞系，不能获得动物个体 培养目的 （应用） 1.快速繁殖、培育无病毒植株 2.生产细胞产品 3.制造人工种子 4.转基因植物的培育 1.生产蛋白质等生物制品 2.培养皮肤移植的材料 3.检测有毒物质 4.用于生理病理药理学的研究 联系 均为人工条件下的无菌操作,都是合成培养基，都需要适宜的温度,pH值,O2等条件 【典型例题】 1． A．容易产生各种变异　　　　 B．具有更强的全能性 C．取材十分方便　　　　　　 D．分裂增殖的能力强 2．下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是 （ ） A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B．原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞 C．动物细胞培养一般能够传到40～50代，但其遗传物质发生了改变