猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的研究进展.pdfVIP

·206· 疾病防治 中国畜牧兽医 猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的研究进展 苗立中，沈志强 (山东省滨州畜牧兽医研究院，山东滨州 256600) 性猪繁殖与呼吸综合征，采取快速准确的诊断方法与技术确定病原在PRRS的整个防控过程中具有举足轻重的作用。作者 详细介绍了PRRsV诊断方法和技术的最新进展，以期为猪繁殖与呼吸综合征的诊断与防控提供技术支持和参考。 关键词：猪繁殖与呼吸综合征；诊断技术方法；研究新进展 中图分类号：S852．65+9．6 文献标识码：A 文章编号：1671—7236(2012)10—0206一05 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRsV)为单股正立即冷藏或冷冻，接种PAMs细胞后1～4d即可出 链RNA病毒，在第10次国际病毒学大会上将该病现CPE，细胞呈现灶状变圆、膨大，之后皱缩，脱落形 毒归属于新设立的动脉炎病毒科、动脉炎病毒属。 d，5～6 猪繁殖与呼吸综合征病毒可危害各种日龄阶段的 需在感染后2～6 d波及整个细胞单层。 猪，并且临床表现多样，同时引起细菌病或病毒病等 h即 继发感染，导致临床症状的复杂化。因此，仅根据临 可出现典型的CPE变化。不同分离株在细胞培养上 诊症状及流行病学特点很难作出诊断，此病的诊断 生长情况不同，有些病毒分离株并不导致细胞出现 必须借助于实验室诊断技术。作者主要对近年来实 CPE现象，因此，必须同时结合间接免疫荧光试验 验室诊断方法的进展作一综述。 1病毒分离与鉴定 病毒分离鉴定是目前病毒病最确切的一种诊断 2血清学诊断方法 方法。常用于PRRSV分离的细胞主要有猪肺泡巨 血清学试验是一种传统的PRRSV诊断方法， 并可用于病毒抗原和抗体的检测。其特点是有较强 噬细胞(PAMs)、非洲绿猴肾细胞(MA一104)和CL一 的特异性，但敏感性大多不够高。 2621、Marc一145等，以及克隆自Marc一145的更敏感 2．1 中和试验 的HS．2H细胞(Valicek等，1997；Shimizu等，1994； 特异性好，但中和抗体出现比较晚，感染后4～5周 Botner等，1994)。一般情况下，病料采自新生仔 猪，新生仔猪病毒分离成功率要远大于成年猪；常用 才能第一次检测到VN抗体，感染后10周达到峰 于病毒分离的样品有血清、肺脏、肺泡洗出物、脾脏、 淋巴结和扁桃体，尤其以血清和肺脏组织分离成功 率最高；同时，样品应采自无病毒中和抗体(VN)的 猪，VN抗体产生较缓慢，一般猪于感染后6～8周入20％的猪新鲜血清增加补体的量，提高了检测的 才产生低滴度VN抗体，较易从急性感染病例猪中 敏感性，在感染后9～11d即可检出较高滴度的VN 抗体。但该方法也需要细胞培养，工作量大，技术要 分离PRRsV；由于初乳中可能含有高滴度的干扰 病毒分离的VN抗体，因此可从吮乳前的弱产仔猪 求高，目前也大多局限于实验室做研究用。 中采样；流产胎儿，特别是妊娠早期和中期流产的胎 2．2 间接荧光抗体试验 间接荧光抗体试验 儿，PRRSV分离成功率也较低；有报道称PRRSV 同的特异性和敏感性，目前在欧洲许多国家和北美 在死胎和新生仔猪中分布情况不一致，死胎更多分 布于脾脏和淋巴结巨噬细胞，而新生仔猪则仅见于