IL-1β和TNF-Α对原代培养与腹侧中脑神经元铁代谢与调控机制研究.pdf

IL．1p和TNF．Q对原代培养的腹侧中脑神经元铁代谢的调控 机制研究 摘 要 帕金森病(Parkinson’S disease，PD)是一种常见的中枢神经系统退行性疾病， 临床表现主要有静止性震颤、肌僵直和运动减少等症状。其主要病理学基础为黑 质(substantia 的纹状体DA含量下降。迄今为止，PD的发病原因仍未完全明了，遗传、环境、 年龄因素导致的如神经炎症、铁代谢异常、线粒体功能障碍、蛋白异常聚集等都 被认为参加了PD的发病。神经炎症反应主要表现为小胶质细胞的激活和炎性因 necrosis 1B，IL．1p)和肿瘤坏死因子a(tumorfactor．a， 子如白细胞介素113(interleukin n旺．a)的大量释放。尸检结果和动物实验证实在PD病人和动物模型的SN和纹 起DA能神经元的凋亡，而阻断IL．1B和TNF．0【的受体可以缓解6一羟基多巴胺 DA能神经元的损伤。这些证据提示炎性因子可能参与了DA能神经元的损伤。在 PD病人脑内炎性因子升高的SN区同时存在铁的异常聚积，而神经炎症反应与铁 聚积之间的关系却并未引起人们足够的重视。本实验应用流式细胞仪技术、免疫 荧光、免疫印迹、酶联免疫吸附实验、激光共聚焦扫描技术等多项研究方法，观 mesenccphalon,VM)神经元的铁代谢，并对其调控机制进行了探讨。结果如下： l、10 显著增强(尸0．01)，铁转出功能显著降低(pO．01)。 2、10 metal element，IRE)的二价金属离子转运体(divalem1，DMTl) responsive transporter 蛋白和mRNA的表达水平都有显著降低(P0．05)。 3、10 regulatory protein，IRPl)的蛋白表达水平有显著增高(P0．05)。 4、10 (reactiveoxide 0Xide，NO)的生成显著增加 species,ROS)和一氧化氮(nitric I ttllll II III Iilll1 1 1 bll 1Y2087541{11131 (P|0．01)。 5、O．5 mmol／L 的一氧化氮合成酶抑制剂N∞．硝基-L．精氨酸甲酯盐酸盐(N∞-Nitro．L．argininemethyl ester D引起的ROS和NO hydrocldoride，LoNA／vlE)预处理O．5h后，可分别阻断也．1 的生成，进而阻断神经元内IRPI的表达上调，TNF．a处理组得到同样的结果。 6、10 水平显著升高(P0．05)。 7、800 ammonium 酸去铁胺(desferrioxamine 小胶质细胞激活可释放大量的IL．1D和TNF．0t，并且这一过程可以被细胞内的高铁 状态所增强，而被铁缺乏状态所减弱。本实验证实了体外培养的小胶质细胞释放的 IL．1B和TNF．a可以调控VM神经元铁的转运，进而导致细胞内的铁聚集和细胞损 伤。本研究首次证实了小胶质细胞可通过释放炎性因子而影响神经元的铁代谢，从 而为PD中神经炎症和铁代谢异常之间的相互作