菜豆晕疫病检测技术研究进展.pdfVIP

ofAnhui 安徽农业科学，Journal A班．Sci．2013，41(10)：4365。4367 责任编辑乔利利责任校对李岩 菜豆晕疫病检测技术研究进展 陈曦，张明哲，林晓佳，夏拯，陈吴健，吴志毅+ (浙江省检验检疫科学技术研究院，浙江杭州310016) 摘要介绍了生理生化检测技术、经典血清学检测技术、现代分子检测技术3种常用的菜豆晕疫病传统检验技术，并讨论了免疫磁性一 实时荧光PCR技术、环介导等温扩增技术和红外光谱检测技术3种植物病原细茵最新检测技术应用于菜豆晕疫病的可能性。 关键词菜豆晕疫病；检测技术；研究进展 中图分类号$435．29文献标识码，A 文章编号0517—6611(2013)10—04365一叭 目前我国外来生物入侵情况十分严重，一些危险性外来 前针对菜豆晕疫病菌已有较多该方法检测试剂盒。该方法 有害生物相继传入，新的疫情不断突发，据中国农业科学院 效果较好，检测过程易操作。但是该方法检测目标单一，不 万方浩研究员报道，每年各种外来有害生物对我国造成的总 适用于口岸检测。 经济损失估计在2000亿以上。另外，随着社会和经济的发 1．3现代分子检测技术现代分子检测技术的建立使得植 展，我国为了使各种蔬菜杂粮能保障供应，开通了农副产品 物病原细菌检测向更快捷、稳定的方向发展。20世纪后期， 的绿色通道，使得以前仅在局部地区发生的疫情也逐步扩散 核酸分子杂交技术在植物病原细菌检测方面广泛应用。但 蔓延。 是由于其耗时长、自动化程度低、检测结果稳定性差、试验条 2011年浙江共进口大豆302万t，至2012年已达到331件难以掌握的特点，逐渐被PCR技术取代。PCR技术的发 万t。随着大豆进口量的日益增加，其可能携带的有害生物 展经历了从传统PCR技术到实时荧光PCR技术的发展，目 进入我国的风险也越来越大。菜豆晕疫病菌(Pseudomona—s 前国内对菜豆晕疫病菌的2种PCR检测技术都已做了相关 savastanoi pv．Phaseolicola)作为一种豆科重要病原物，可侵 研究。然而，传统PCR技术易有假阳性的发生，而实时荧光 染扁豆、赤豆、木豆、桑橙、多花菜豆、月豆、菜豆、碗豆、葛、野 PCR技术则存在设备成本高的缺点。 葛、绿豆、豇豆和大豆。尽管很多国家采取了一系列防御措 2植物病原细菌检测新技术 ，， 施，该病害仍以惊人的速度传播和蔓延，至今已在世界各大 由于传统的检测技术在日常检测中存在各种问题与缺 洲的60多个国家和地区有分布。该病菌主要传播途径是通 陷，随着科学技术的发展，对植物病原细菌的检测手段也日 过带毒种子传播，在种子上可潜伏存活2年以上时间，一旦 益繁多。下面介绍了几种植物病原细菌检测新技术，并探讨 进人我国将造成巨大损失。因此，加强口岸检疫工作，从源 了其在菜豆晕疫病检测中的应用。 头杜绝该病菌是最佳方法。鉴于此，笔者介绍了该病目前常 2．1免疫磁性一实时荧光PCR技术免疫磁性一实时荧 用的检验技术，并探讨了植物病原细菌的最新检测技术应用 光PCR技术将经典的血清学检测技术与觐代分子检测技术 于菜豆晕疫病的可能性，以期为预防菜豆晕疫病提供借鉴。 相结合，其检测灵敏度达到50～100cfu／ml，将PCR检测技 1菜豆晕疫病传统检测技术 术灵敏度提高了100倍左右晡J。该方法具有准确、灵敏、快 菜豆晕疫病作为一种豆科细菌性病害，其传统的检测技 速等优点。 术主要有生理生化检测技术¨1、血清学检测技术旧‘31及现代 由于血清学和荧光PCR检测技术在菜豆晕疫病菌检测 分子检测技术M-。 ． 中已被普遍应用，所以利用免疫磁性一实时荧光PCR技术 1．1 生理生化检测技术 以前生理生化检测技术主要依据 对该菌进行检测已具备完善基础，仅需进行部分反应条件的 菌落形态、培养性状、烟草过敏性反应