重点一株反硝化聚磷细菌的分离及鉴定.pdfVIP

第30卷第2期 水产 科 学 Vol-30No．2 2011年2月 FISHERIESSCIENCE Feb．201l 一株反硝化聚磷细菌的分离及鉴定 郑宗林1’2，唐 敏3，何文平2，向 磊3，刘鸿艳4，刘 波1 (1．中国水产科学研究院淡水渔业研究中心，农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重 点开放实验室，江苏无锡214081；2．西南大学鱼类繁殖与健康养殖中心，重庆402460； 3．曲靖市农业局水产站，云南曲靖，655000；4．山东省滨州市海洋渔业局滨州海洋环境 监测站，山东滨州，256600) 摘 要：通过建立的一种简单的反硝化聚磷菌筛选方法，获得一株源自池塘底泥的反硝化聚磷菌 RCll，利用细菌自动分析鉴定仪等方法对其进行种属鉴定，确定其分类地位。试验结果表明，菌株 RCII具有合成聚}羟基丁酸和多聚磷酸盐的能力，硝酸盐还原阳性；在好氧情况下，可以直接利用培 养基中的有机物(如乙酸、蛋白胨)氧化产能，吸收培养基中的磷酸盐合成多聚磷酸盐；能够利用硝酸盐 进行反硝化聚磷，但在高浓度亚硝酸盐存在时，则表现为释磷；硝酸盐和乙酸钠同时存在于培养基中 时，也出现缓慢的吸磷现象．经鉴定，菌株RCll属假单胞菌属细菌． 关键词：反硝化；聚磷；反硝化聚磷菌；分离；鉴定 中图分类号：$933．31 文献标识码：A 文章编号：l003—1111(2011)02—0074．05 南非开普顿大学(UCT)研究人员最早发现某 1材料与方法 些兼性反硝化细菌具有很强的生物摄／放磷现象。 1．1材料来源 后来荷兰代尔夫特工业大学和日本东京大学的研 究人员合作研究确认了反硝化细菌的这种摄／放磷 重庆某区池塘底泥。 de— 1．2试验仪器 特性，并称之为“反硝化除磷”(Denitrifying 生物显微镜(OLYMPUSIX70)，紫外分光光 phosphatation)。这种有聚磷作用的反硝化细菌被 SPECTRONIC 冠名为反硝化聚磷菌，它与好氧聚磷菌有着相似的 度计(THERMO HELIOS-T)，纯水 MOv- 除磷特性Ⅱ]和生化代谢模式。关于反硝化聚磷菌 器(LABCONCO9000602)，烘箱(SANYO 国内外已有报道，但是这些研究都是以活性污泥作 112F)、高压蒸汽灭菌锅(SANYOMLS-3780)，石 为研究对象得到的结论[2]。由于受到活性污泥复 英双重纯水蒸馏器(上海申生1810D)，台式离心机 杂的微生物组成影响，对其磷酸盐代谢特性的深人 (太仓华美TGLL-18K)，超净工作台(上海淀山湖 研究带来了较大的困难[3]。微生物纯种培养技术 SDJ一0S)。电子天平(METTLERTOLENDO 在研究微生物的生理特性、代谢活动中发挥着重要 ABl04-N)，磁力搅拌器。 1．3培养基‘5卅 作用，虽然目前发现能够进行纯培养的微生物仅约 占整个微生物总量的1％[4]，且通过纯培养的方法 牛肉膏蛋白胨固体培养基(g／L)：牛肉膏3；蛋 得到的研究结果有时会与实际情况有差别，但纯培 白胨10；蒸馏水1000ml；琼脂10；pH7．0。 养技术作为一种经典的研究手段应用至今不衰，足 硝酸盐还