柳茶多糖的分离纯化及气相色谱-质谱分析.docVIP

柳茶多糖的分离纯化及气相色谱-质谱分析 　　 　　【摘要】 目的首次提取柳茶中的水溶性粗多糖并进行分离、纯化及组成分析。方法柳茶经热水提取、乙醇沉淀、Sevag法去蛋白、H2O2脱色，逆向流水透析得多糖精制品。将精多糖衍生化后运用气相色谱-质谱法对其化学成分进行分析。结果确定了柳茶中水溶性多糖分别由核糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成，其中以核糖、葡糖糖、半乳糖为主。结论该方法简便、灵敏，可以准确测定出柳茶多糖中所含有的各种单糖。 　　【关键词】 柳茶多糖; 纯化; 气相色谱-质谱; 单糖 　　Abstract：ObjectiveTo isolate and purify the water-soluble polysaccharide from Liucha and analyze the chemical composition of liucha.MethodsThe liucha was extracted in hot water， then the polysaccharide in the filtrate was fractionally precipitated by alcohol，after that the proteins in the precipitated product were removed by Sevag reagent，hydrogen peroxide decolor， the hydrolysate of polysaccharide was dialyzed by the reverse flow to get the fine product. Finally， the chemical compositions of the fine product after derivatization were examined by the gas chromatography-mass spectrometric analysis.ResultsThe polysaccharides are composed of ribose，mannose，glucose and galactose.The major monosaccharide components are ribose， galactose and glucose.ConclusionThe method reported in this paper is simple，and can be used for analysis of monosaccharides hydrolyzed from Liucha polysaccharide. 　　Key words： Liucha polysaccharide; Purify; Gas chromatography-mass spectrometry; Monosaccharide 　　柳茶为藏族民间常用药，以蔷薇科(Rosaceae)鲜卑花属(Sibiraea)植物窄叶鲜卑花Sibiraea angustata (Rehd.) Hand-Mazz. 和鲜卑花Sibiraea laecigata (L) Maxim.的枝叶及果序(带果实的果枝)入药，主要用于消食导滞、疏散风热;据藏药文献记载，柳茶主治热病和疫病[1]。现藏族民间常作茶饮，治疗食后腹胀等诸多原因引起的消化不良，每每见效。柳茶中除含有挥发油、微量元素外，通过实验发现还含有丰富的多糖。多糖作为提高机体免疫功能的保健品已被许多人接受，但许多多糖产品仅仅停留在保健品阶段，未能开发成药物，主要原因是多糖的分离纯化困难，技术不过关。因此本文旨在对柳茶多糖的提取、纯化、组分分析进行研究并对其营养保健功能进行探讨，以期为柳茶的开发及其综合利用提供参考。 　　1 仪器与材料 　　1.1 仪器 UV-2450紫外分光光度计(日本岛津) ; NE2155电子天平(德国赛多利斯仪器公司);Agilent 5793I-6890气相色谱-质谱联用仪(GC-MS);SE-54弹性石英毛细管柱(50 m×0.25 mm id×0.50 μm);高纯氦(纯度≥99.999%);旋转蒸发仪(上海青浦泸西仪器厂)。 　　1.2 材料 鲜卑花属植物叶采自甘肃省甘南藏族自治州合作市郊，海拔3 200 m以上。经兰州大学药学院生药学研究所杨永建教授鉴定其为蔷薇科(Rosaceae)鲜卑花属(Sibiraea)植物窄叶鲜卑花Sibiraea angustata (Rehd.) Hand-Mazz. 和鲜卑花Sibiraea laecigata (L) Maxim.的叶。 　　单糖标准品葡糖糖、阿拉伯糖、核糖、甘露糖、木糖、果糖、半乳糖标准品 (Fluka