兔脂肪干细胞(ADSCs)与聚羟基乙酸-壳聚糖(PLGA-CS)支架材料生物相容性研究.pdfVIP

610 兔脂肪干细胞(ADSCs)与聚羟基乙酸／壳聚糖 (PLGA／CS)支架材料生物相容性研究 李春波1 王 红2 陈增淦1 陈统一1 张 峰1 周建平1 崔 磊3 尹静波4 (1复旦大学附属中山医院骨科，2普外科上海200032；3上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海200011 4上海大学材料科学与工程学院高分子材料系 上海200444) 【摘要】 目的 derivedstem 探讨兔脂肪来源干细胞(adipose cells，ADscs)作为种子细胞复合新型聚羟基乙酸 co (polylacticglycolicacid，PLGA)／壳聚糖(chitosan，cs)支架材料的生物相容性，为进一步构建组织工程化脂 肪组织提供实验依据。方法 取雄性新西兰大白兔腹股沟脂肪组织，I型胶原酶消化分离出ADscs进行培养， 贴壁细胞至3～5代，评价其多向分化能力。将干细胞收集重悬后，以l×107／mL的密度接种于多孔PLGA／cs 支架，形成细胞支架材料复合物。培养7天后，扫描电子显微镜观察细胞在支架材料上的黏附生长和基质分泌 情况，评价细胞与支架材料的生物相容性；Dil荧光标记检测细胞在支架材料上的分布；Hochest33258检测细胞 在支架上的生长情况。接种1和7天后，分别对细胞材料复合物行AnnexinV／PI双染色法检测材料对细胞的 毒性作用。用成脂诱导条件培养基诱导分化ADscs及ADscs支架材料复合物，7天后，尼罗红荧光染色液检 测ADscs在不同环境下的成脂分化能力。结果原代培养的ADscs呈成纤维细胞样外观，在相应诱导条件下 能够分化为脂肪细胞和骨细胞。细胞接种于PLGAL／cs支架材料上第8天分裂增殖达到高峰，扫描电子显微镜下 提示ADscs在支架表面贴附生长良好，并向孔隙内壁充分延伸，细胞周围形成丰富的基质成分。活死双染结合共 聚焦显微镜显示材料对细胞活性无影响，尼罗红染色可见成脂诱导后的ADscs细胞质内有红色脂滴颗粒形成。 结论多孔PLGA／cs支架与兔ADscs具有良好的生物相容性，可作为构建组织工程脂肪组织的支架材料。 【关键词】 脂肪干细胞(ADSCs)；生物相容性； 组织工程； 聚羟基乙醇(PLGA)；壳聚糖(CS) 【中图分类号】 R318．08 【文献标志码】 A doi：10．3969／j．issn2014．05．007 ofrabbit stem Biocompatibilityadipose—derivedcells(ADSCs)with porous chitosan polylactic—co—glycolicacid(PLGA)andscaffold(CS) LIChun％01 ，WANG Hon92，CHEN Zengganl，CHENTongyil， ZHANG Fen91，ZHOUJianpin91，CUILei3