温敏型聚合物PNIPA和P(NIPA-co-SA)的制备及其协助溶菌酶复性研究.pdfVIP

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2017-08-21 发布于北京
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温敏型聚合物PNIPA和P(NIPA-co-SA)的制备及其协助溶菌酶复性研究.pdf

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温敏型聚合物PNIPA和P(NIPA-co-SA)的制备及其协助溶菌酶复性研究.pdf

第24卷第l期高校化学工程学报 N0．1V01．24 2010年2月 ofChemical ofChineseUniversities Journal Engineering Feb2010 文章编号：1003-9015(2010)01-0099．07 葛翔，金佳钰，关怡新，姚善泾 (浙江大学化学工程与生物工程学系，浙江杭州310027) 摘要：采用反相悬浮法合成了温敏型聚合物聚N．异丙基丙烯酰胺(PNIPA)凝胶及其与丙烯酸钠(SA)的共聚凝胶 P(NIPA-cO-SA)，对凝胶的形态、粒径分布、表面特性以及温敏性能进行了考察，共单体丙烯酸钠的引入使得凝胶的最大溶胀倍率和低临界溶解温度(LCST)都有明显的提高。将两种凝胶用于目标蛋白溶菌酶的体外复性过程，考察了其协助复性的效果。结果表明；当蛋白浓度为250lag·mL一时，加入80mg·mL-1PNIPA凝胶可使溶菌酶的活性回收率由稀释复性的51．3％提高到72．9％；加入120 mg·mL-1P0qIPA-go-SA)共聚凝胶可使活性回收率达到71．5％。溶菌酶的浓度越高，与稀释复性相比凝胶协助复性的效果就越好．复性后凝胶可方便地分离回收。PNIPA凝胶重复使用6次后，溶菌酶的活性回收率仍高于稀释复性15％以上．关键词：温敏型聚合物：聚N-异丙基丙烯酰胺；丙烯酸钠；共聚凝胶；溶菌酶；蛋白质体外复性中图分类号：TQ932 文献标识码：A of Thermo--SensitiveofPNIPAand their Synthesis Polymers P(NIPA··co--SA)and inthe ofDenatured vitro ApplicationRefolding Lysozyme／n GE Xiang，Jib／Jia-yu，GUANYi·xin,YAOShan-jing ofChemicaland (Department BiologicalEngineering，ZhejiangUniversity,Hangzhou310027，China) Abstract：Thethermo·-sensitiveofPNIPAand were polymers P(NIPA--co·-SA)gelparticlessynthesizedby and ofthe inverse distributionthermo-sensitivecharacteristics suspensionpolymerization．Themorphology,size itwasfoundthat maximal ratioandlowercriticalsolution were the preparedgelparticlesstudied，and swelling the increase withtheadditionofsodium temperature(LCST)ofpreparedgelparticles obviously acrylate(SA)