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麻疹病毒检测方法研究进展 刘凤翔 【中图分类号】Ｒ５１１．１　　　　【文献标识码】Ａ　　　　【文章编号】１６７２－３７８３（２０１２）０６－０４６５－０１ 【摘要】麻疹病毒（ＭＶ）是一种导致全球性传染病、给人类健康带来极大危害的病原体。ＭＶ的实验室检测对麻疹的监测、预防、判断预后及采取恰当的处理 措施，均具有非常重要的流行病学意义和临床应用价值。而麻疹病毒实验室检测技术的发展对检测方法的改进和完善同样具有重要意义。 【关键词】麻疹病毒；检测；进展 　　麻疹是由麻疹病毒引起的急性出疹性呼吸道传染病，是已知的对人类传染 性维生素，对亲和素有独特的亲和力，两者能形成稳定复合物，通过连接在亲和 性最强的疾病之一。世界卫生组织（ＷＴＯ）已将麻疹作为消灭脊灰之后又一个 素或抗生物素蛋白上的显色物质（如酶、荧光素等）进行检测。地高辛是一种类 ［１］ 通过免疫手段消除的传染病 。因此，采用快速、特异、敏感的实验室检测方 固醇半抗原分子，可利用其抗体进行免疫检测，原理类似于生物素的检测。地 法，对于及时发现和确诊麻疹病人，迅速控制疫情、降低麻疹发病率具有重要意 高辛配基化脱氧尿嘧啶核苷标记的核酸探针技术，是上世纪９０年代才发展起来 ［２］ 的一种新型非放射性探针标记技术。由于它具有较高的灵敏度，又克服了放射 义，也是实现消除麻疹目标的重要技术保障 。 １　方法 性同位素标记技术的固有缺点，而特异性优于生物素标记，具有灵敏、安全、简 ［９］ １．１　病毒分离 便、实用等优点，具有广阔的应用前景 。 虽然目前麻疹病毒的实验室检测方法种类很多，但病毒分离仍是不可替代 １．４．２　基因芯片［１０］ 的经典方法，多用于病毒的分子流行病学研究。 基因芯片也称基因微阵列技术，指通过原位合成等手段，将数以万计的靶 １．１．１　最初Ｂ９５ａ细胞（含ＥＢ病毒的绒毛猴Ｂ淋巴细胞）是用于麻疹病 基因或寡核苷酸片段固化于支持物上，产生探针阵列，然后与标记的样品进行 毒分离的首选细胞系。但是细胞中含有ＥＢ病毒对操作者可能造成危害，因此 杂交，通过监测杂交信号来实现对样品进行快速、并行、高效的检测。 Ｂ９５ａ已不再是麻疹病毒分离的首选细胞。 一张芯片上集成成千上万密集排列的分子微阵列，能够在短时间内分析大 １．１．２　Ｖｅｒｏ／ＳＬＡＭ细胞是目前ＷＨＯ推荐麻疹网络实验室使用的细胞， 量的生物分子，快速准确地获取样品中的生物信息，效率提高百至千倍。目前， ［３］ 尽管基因芯片技术已经取得了长足的发展，但仍然存在着许多诸如技术成本 Ｖｅｒｏ／ＳＬＡＭ细胞分离麻疹病毒与Ｂ９５ａ细胞具有同样的敏感性 。该细胞的优 点是不含有感染性病毒，对实验室人员而言具有安全性。 高、操作复杂、分析范围狭窄等尚未解决的难题。 病毒分离法因培养周期长、实验操作复杂、受时间限制、生物影响因素多等 １．４．３　蛋白质芯片 原因，已逐渐被一些快速、准确 、简便的检测方法所代替。尽管如此，病毒分离 蛋白质芯片技术灵敏度远高于ＥＬＩＳＡ（ＥＬＩＳＡ检测抗原的最低限为 １００～ 法仍是病毒检测的经典方法。因病毒变异快，病毒分离法可以分离出最新流行 ２００ｎｇ，而蛋白芯片可达１０～２０ｎｇ），已逐渐应用到各种病原体检测中。ＬｉＤ等［８］ 的病毒变异株，对鉴定新发传染病意义重大，还可为疫苗研发分离毒株。 将快速斑点免疫金渗滤试验与蛋白质芯片技术相结合建立了一种病原体检测 １．２　经典血清学方法