动力学荧光光度法测定人发中痕量镍.pdfVIP

维普资讯 PTCA PARTB：CHEM ．ANAL。 动力学荧光光度法测定人发中痕量镍 陈兰化 。胥明圣 淮北煤炭师范学院化学系，淮北 235000 中图分类号：0657。32 文献标识码：B 文章编号：1001—4020 2008 06—0578—02 镍是人体的必需微量元素之一，在人体内参与 激发波长，536rim为发射波长，用 1cm荧光 比色 一 些酶的组成和代谢；镍能增强胰岛素分泌，有降低 皿，分别测定空 白溶液的荧光强度 F0及含镍溶液 血糖作用；适量的镍能促进脱氧核糖核酸 DNA 和 的荧光强度 F，并计算出对应的AF Fo— F 值。 核糖核酸 RNA 正常生理功能的发挥，但若量过 2 结果与讨论 多，会使 RNA复制失真，DNA受到损伤，引起突 变，甚至致癌 ¨1]。因此，研究人体 内镍含量的测定， 2．1 荧光光谱 具有重要的意义。测定镍最常用 的方法是原子吸收 曙红Y是一种酸性染料，它的水溶液可显示淡 光谱法和丁二酮肟光度法[。】、动力学光度法[ 等。 绿色荧光。在近中性介质中，用 850型荧光分光光 本试验在近中性介质中，痕量镍对过氧化氢氧化曙 度计绘制了几种不同体系溶液的激发和发射光谱 红Y反应具有很强的催化作用，采用更灵敏的荧光 图1 ，几种体系溶液的最大激发波长和最大发射 法检测，建立了动力学荧光光度法测定人发中痕 波长均为51612m和 536rim。无镍 1I 存在，过氧 量镍 。 化氢氧化曙红Y的反应进行得很慢，当镍 11 存在 时，反应速率明显加快，说明镍 11 对此反应有很强 l 试验部分 的催化作用。 1．1 仪器与试剂 850型荧光分光光度计 ；930型荧光光度计 ； CS501型超级恒温器 。 镍标准溶液：1．000g·I一，用高纯镍粉配制， 使用时逐级稀释为 1．0mg ·L 标准工作液。 曙红Y EY 溶液 生物染色素 ：2．0×10一mol · I 。 磷酸盐缓冲溶液 pH6．8 ：用0．2otol·I 氢 氧化钠溶液和0．2otol·I 磷酸二氢钾溶液按比 l，l EY 2，2 H2O2+EY 例配制。 3，3 40．0ktg ·L一 Ni 1I +H202+EY 图 l 荧光激发 a 和发射 b 光谱 混合酸：硝酸、高氯酸以体积比5比1混合。 Fig．1 Excitation a andemission b fluorescencespectra 试剂均为分析纯以上，水为二次去离子水。 12 试验方法 2．2 反应条件的选择 选用两支25mL比色管，依次加人曙红Y溶液 2．2．1 反应介质及酸度的影响 1。0mI，磷酸盐缓冲溶液 2．0mI，0．3 体积分 试验了氨水一NH C1、Na2B407一NaOH 、NaOH、 数，下同 过氧化氢溶液 1．5mL，用水稀释至刻度， 磷酸盐缓冲溶液等介质对反应体系的影响。试验发 摇匀。置于沸水浴中加热 10min，取出后立即用流 现：以磷酸盐缓冲溶液最好；当选用 pH 6．8的磷酸 水冷却 5min，在荧光分光光度计上，以516rim为 盐缓冲溶液 1．5～2．5mL时，△F值最大且稳定。 试验选择2．0mI。 收稿 日期：2007—01—20 · 578 · 维普资讯 陈兰化等：动力学荧光光度法测定人发中痕量镍 2．2．2 试剂用量的影响 Ca。+、M：g2 、Zn。+、Ba。+、CA。+、Pb。+、NOa-一、SC蜻一、 试验结果表明：曙红Y溶液的用量愈少，△F值 C1～、N 、I一、Br一、P0i一、Mo VI 、Cr VI ；500倍 愈大，测定镍的灵敏度愈高，但相应的线性范围变 的AP+、CP+、H +、V V ；200倍的Bi抖、A 、 窄，选用 2．0×10一qmol·L～曙红 Y溶液 1．0mL； Mn。+、Sn+；100倍 的Co。+；5O倍的Fe。；1倍 的 随着过氧化氢用量的增加，△F值随之增大，当过氧 Cu抖。加入 2Og ·L 硫脲溶液 2．0mI，可允许 化氢的用量增加至 1。5mI时，△F值达到最大值， 200倍的Cu。+存在。 如继续增加用量，则 △F值又随之减少，选用0．3 2．4 工作 曲线、精密度及检 出限 过氧化氢溶液 15mI。 在选定的工作条件下测定镍标准系列溶液 ，镍 2．2．3 反应温度的影响 的线性范围为 4．0～80．0btg ·I～，其线性回归方 试验结果表明：在低温时反应几乎不发生；当温 程为：AF 1．06c+2．31，相关系数为0．9984。对 度达 70℃以上，随温度 的升高反应逐渐加快，并与 2O．0btg ·L 镍标准溶液进行 11次平行测定，得到 温度呈线性关系；100℃时，