免疫分析新原理与新方法研究.pdfVIP

免疫分析新原理与新方法研究 鞠煜先睾 (南京大学化学化工学院，生命分析化学教育部重点实验室，南京210093) 摘要：近年来，我们围绕肿瘤疾病的临床诊断需要，开展免疫分析新原理与 新方法研究，研制出10种电化学免疫传感器、2种免疫检测芯片和6种免疫反 应室，构建了免分离、准无试剂、全无试剂和多组分同时免疫分析新原理，创 建了底物区带分辨、通道分辨、底物区带．通道二维分辨免疫分析新概念。建立 检测新技术，提出了多标志物同时安倍与化学发光免疫检测的自动化检测装置。 关键词：免疫分析；临床诊断；免疫传感器；多通道；芯片；安倍法；化学发光 基于抗原．抗体特异性反应与高灵敏度检测手 学发光和时间分辨荧光在线免疫分析新方法，提 段的免疫分析，是分析复杂样品体系有效方法。 出了化学发光底物区带分辨、通道分辨、底物区 近年来，随着生物传感器技术的发展而出现的免 带一通道二维分辨免疫分析新概念，用于多组分 疫传感技术，在环境监测、临床诊断、食品安全、 TM的同时检测。 药物分析与微生物检验等领域得到了广泛的应用。 4电化学免疫传感器与免疫芯片 围绕肿瘤疾病的临床诊断，我们以癌胚抗原 提出了一系列新型生物分子的固定材料，构 建了仿生或生物相容界面，研制成10种用于TM (皿～)、甲胎蛋白(J岬)、人绒毛膜促性腺激素 (hOG)、CAl25、CAl99、CAl53等常用肿瘤标志物检测的电化学免疫传感器和2种一次性免疫检测 为对象，从临床意义的探讨、在线免疫分析新方 芯片。 法的建立和免疫传感器件、检测芯片与免疫反应 室的研制人手，开展了免疫分析新原理与新方法 疫反应结合Imp标记抗体后，利用HRP直接电子 研究，主要包括如下5个方面。 传递进行检测，提出了CAl25和hCG的无试剂免 1肿瘤标志物的临床意义 疫传感器。用金胶纳粒子修饰HRP标记hCG抗 提出了血清CAl25、胃泌素前体释放肽对于体，n02凝胶固定，免疫反应后HRP直接电子传 肺癌患者的特异性和血清VEGF与Endostatin水平递信号降低，由此提出了检测hCG的无试剂免疫 对于乳腺癌监测的，通过联合检测CEA、CAl99、 传感器。用有机修饰的凝胶固定HRP标记hCG或 CAl25和CAl53，提高了恶性肿瘤的检出率。CEA抗体，免疫反应后HRP直接电子传递信号降 2电化学免疫检测新方法 低，可用于hCG或CEA的无试剂免疫传感。 分别建立了灵敏、快速的AFP与CEA电化学 将Ⅲ口标记抗体和电子传递媒介体同时共价 检测新方法，提出了免分离、准无试剂和全无试 交联在电极表面，免疫反应结合CEA后，酶与媒 剂的免疫分析新原理，构建了流动注射电化学在 介体作用受到空间阻碍，信号降低，提出了检测 线免疫分析新技术和多分析物同时检测的高通量 CEA的准无试剂免疫传感器。用电子传递媒介体 电化学免疫检测系统。 修饰金电极，检测包被孔夹心免疫反应后带入的 3化学发光和时间分辨荧光在线免疫分析新方法 }Ⅱ诤标记CEA抗体的酶活性，进行CEA检测。用 将流动注射与免疫亲和技术结合，建立了化 可溶性碳纳米纤维键合CAl25抗原和硫堇，构建 ·EIm诅：laxju@nju．edu．cn。Tel：ff25 一，36～ 了CAl25的免分离免疫传感器。被固定的酶标抗 光底物区带，并在移动式光门的辅助下实现4种 体能够有效地催化过氧化氢氧化硫墓的反应。该 肿瘤标志物的顺序检测。这些传感器可连续或再 传感器检测CAl25的线性范围为2．0—