母爱剥夺对大鼠子代神经行为发育和海马reelin表达的影响.pdfVIP

·261· ·学术交流· 母爱剥夺对大鼠子代神经行为发育 和海马reelin表达的影响 秦丽娜涂文强孙秀敏赵虎 【摘要】 目的探母爱剥夺对子代雄鼠出生后早期神经行为发育和海马丝氨酸蛋白酶reelin蛋白表 达的影响。方法将刚出生的仔鼠随机分为母爱剥夺组(MD)和对照组(Con)，母爱剥夺组仔鼠与母鼠每 天隔离3h，对照组母鼠和仔鼠不隔离。子代大鼠哺乳期神经发育不同时间点(出生4天、6天、8天、10天、 12天、14天、16天、18天、20天)监测各组仔鼠早期神经行为发育各项指标。第22天、60天、90天母爱剥 夺后选大鼠雄性分别进行旷场实验和Morris水迷宫测试，用免疫组化方法检测海马reelin蛋白的表达。结 果早期神经行为发育指标检测中：母爱剥夺可明显影响仔鼠体重(P0．05)。在神经行为方面，平面翻 正、空中翻正、负趋地性、热板实验、前肢握力和行走能力实验中对照组较剥夺组大鼠有一定优势，但未出 现明显差异(P0．05)。Morris水迷宫空间学习记忆实验：对平均逃避潜伏期、上台前路程和短空间探索 能力的影响检测结果：母爱剥夺组合对照组比较，22天影响最大，60天，90天的影响逐渐减小。海马reelin 蛋白的表达：母爱剥夺后reelin蛋白表达逐渐降低，22天组表达降低较明显(PO．05)。60天和90天tee— lin蛋白表达较正常组低，但差异无显著性(P0．05)。结论母爱剥夺导致子一代雄性大鼠在早期生长、 神经生理反射及神经行为方面出现不同程度的发育延迟，但没有明显影响大鼠旷场实验中对新异环境的 适应能力；子代大鼠在Morris水迷宫的空间记忆能力有一定影响，随年龄增大，影响减小；海马reelin蛋白 的表达减少。 母爱剥夺是哺乳动物生命早期的严重应激事件之 材料与方法 一，对子代的生长发育会产生影响，可导致子代成年后 一、实验试剂 在认知、记忆、情绪等精神活动方面异常，已经被许多 临床回顾性研究所证实，其原因可能与神经系统的损 公司提供)，ABC免疫组化试剂盒(武汉博士德生物工 伤与再生、神经生化改变、内分泌改变等诸多因素相 程有限公司)，5％牛血清封闭液，生物素化羊抗小鼠 关…。已经有研究报道母爱剥夺可以引起成年子代 IsG二抗，SABC试剂，DAB显色剂(博士德)。 糖皮质激素受体的表达变化，造成对再次应激事件易 二、实验动物分组 感性升高口j。无数的生化线索阐明了胚胎时期大脑 正常Wistar孕鼠20只，作为亲代大鼠，在彤暗 发育确切的神经环路构建过程，这个过程需要许多蛋 白之间的高度配合，并通过生化和遗传机制控制的时 养(自由摄食和饮水)，单笼饲养。生产后，每笼饲养 空相互作用。这些蛋白其中一个最突出的是细胞外相 一窝(10一12只)新生大鼠和1只哺乳期母鼠。仔鼠 关的丝氨酸蛋白酶reelin。Reelin对正常大脑发育是 出生后称重并随机将仔鼠分为母爱剥夺组(MD)和 至关重要的[3。5]。在胚胎中枢神经系统发育过程中， reelin是由位于边缘区的CajalRetzius细胞专门分泌 MD90 d组，对照组也相应分组。取雄性仔鼠进行旷场 的，对于神经细胞向心迁徙形成一个高度层合结构的 实验和水迷宫检测以及reelin蛋白检测。 新皮层、海马和小脑，具有重要的作用H’6。引。若在这 母爱剥夺模型的建立