717解毒合剂对蝮蛇咬伤大鼠血清HAase干预作用研究.pdfVIP

717解毒合剂对蝮蛇咬伤大鼠血清HAase干预作用的研究 王万春严张仁毛文丽 张世鹰徐小港李 颖 易 军 (江西中医学院附属医院 江西南昌330006) 摘要：目的：观察717解毒合剂对蝮蛇咬伤大鼠血清透明质酸酶的干预作用。方法：蝮蛇毒经大鼠左下 肢局部皮下注射造模后，中药组、血清组和中药加血清组3组干预治疗，从大鼠球后静脉取血，采用ELISA 法检测各组大鼠在实验不同时段血清HAase的水平。结果模型组血清HAase的含量高于正常组(P0．05)。 治疗后与模型组比较，各治疗组血清HAase含量降低(PO．05)，且以中药加血清组疗效最好。结论：717 解毒合剂可以降低蝮蛇大鼠血清HAase值。 关键词：717解毒合剂；蝮蛇咬伤大鼠；血清IIAase 蝮蛇咬伤是一种严重影响人民生命健康的常见灾害性疾病，是毒蛇咬伤中最常见的类型之一。蛇 毒是一种复杂的蛋白质混合物‘川，含有多种毒蛋白。蝮蛇咬人时，其毒液通过毒牙注入皮下组织，随 体循环分布全身，产生局部和全身的中毒症状‘2|。717解毒合剂是我院治疗毒蛇咬伤的有效经验方， 具有清热解毒、凉血祛风、通利二便的功效。本实验旨在观察717解毒合剂对蝮蛇咬伤大鼠动物模型 1 材料 1．1药品与试剂 717解毒合剂(院内制剂，批号：040843，由金银花、野菊花、紫花地丁、蒲公英、黄连、黄柏、 半边莲、七叶一枝花、蝉蜕、防风、白芷、生大黄和车前草等药物组成)；抗蝮蛇毒血清，由上海赛伦 生物技术有限公司生产(批每支6000U)；大鼠HAaseELISA试剂盒由美国贝克曼公司 生产。 1．2仪器 厂)。 1．3动物与蛇毒 N0201 0201 1—0223、JZDWN1—0253；蝮蛇干蛇毒由广西医科大学蛇毒研究所提供(批号98091)。 基金项目：中医药行业科研专项项目(200807009)，江西省自然科学基金课题(2008GZY008) 作者简介：王万春，男，安徽省无为县人，1966年1月出生。博士研究生，教授，主任中医师。主要从事中医外科方向研究。E— ·155· 中华中医药学会2013年学术年会论文选编 2 方法 2．1模型建立 sD大鼠予常规饲料及高温消毒饮用水在常温环境中喂养一周，蝮蛇毒在临用前以1：l生理盐水 作溶媒配制，造模时按0．02ml／g体重于大鼠左后肢剪毛的消毒处皮下进针10ml注射蛇毒，注毒后用 手压迫进针口约一分钟，以防蛇毒从进针口流出。造模成功：大鼠未死亡，只限中毒症状，于注射后 3分钟左右局部变为青色，行走不利；个别大鼠有躁狂症状，注射后1小时左右局部变为暗紫色，肿 硬，甚则水肿水疱，行动迟缓。 2．2分组及给药 将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、中药组、血清组和中药加血清组5组，每组8只大鼠， 雌雄各半。自造模成功后2小时开始给药。血清组：从大鼠尾静脉注射抗蝮蛇蛇毒血清，将血清溶解 周；中药加血清组：予717解毒合剂20ml／Kg·d灌胃，连续一周，同时注射抗蝮蛇蛇毒血清；正常对 照组和模型对照组均予生理盐水20ml／Kg·d灌胃，连续一周。各组大鼠均于注射蛇毒前、注射蛇毒后 2小时、治疗后6小时、治疗后24小时分别从大鼠球后静脉取血检测其血清HAase的含量。 2．3 ELISA法测定 按照2．1，2．2项制备蛇伤大鼠、分组、给药和取血，收集血液，放置4小时后离心，取血清置于 一20。C冰箱备用。临用前平衡至室温，按照ELISA试剂盒说明书步骤进行操作，测定血清HAase的水平。 2．4统计处理 实验数据用(互±S)表示，采用SPSSll．0软件包进行统计，多组间比较用方差分析，两两比较用 t检验，P0．05为差异有显著性意义。 3 结果 3．1 一般情况 正常对照组大鼠状态良好，毛发光泽，体重增加，动作自如，反应灵敏，排泄物正常；各模型组 大鼠进食量减少，精神萎靡，活动减少，行走不利，反应迟钝，毛发欠光泽，体重增加较正常组大鼠 不明显，注射蛇毒局部皮肤暗紫色，肿硬，甚则水肿水疱。给药后，中药加血清组恢复较好，中药组 和血清组效果不如它明显。 3．2各组