藏山羊微卫星DNA复合扩增的条件探索.pdfVIP

湖北农业科学 　HUB EI 　A GR ICUL TU RAL 　SCIEN CES 　No 1 ,2003 89 藏山羊微卫星 DNA 复合扩增的条件探索 1 1 ,2 2 2 1 3 1 1 李孟华 , 王海生 , 张文平 , 康远方 , 赵书红 , 边 　次 , 刘 　榜 , 李 　奎 ( 1 华中农业大学畜牧兽医学院动物分子生物学与育种实验室 , 湖北 武汉 　430070 ; 2 湖北省公安厅刑事科学技术研究所 , 湖北 武汉 　430070 ; 3 西藏农牧学院畜牧系 , 西藏 拉萨 　850000) 摘要 :对微卫星 DNA 的复合扩增与同步扩增进行比较研究 ,结果表明通过优化微卫星位点引物组合 , 以 及复合扩增反应体系中模板 DNA 浓度 、引物浓度 、Mg2 + 浓度 、退火温度和检测时的电泳环境等一系列 条件 ,其扩增产物量以及产物特异性虽然均有所下降 ,然而其扩增产物能准确反映结果 ,且具有方便 、快 捷 、节省等优点 。 关键词 :藏山羊 ;微卫星 DNA ;复合扩增 ;条件 中图分类号 :S188 　　　　文献标识码 :A 　　　　文章编号 :0439 - 8114 (2003) 0 1 - 0089 - 03 ( 　　微卫星 , 又称短串联重复序列 Short Tandem 增 。在法医学研究中 ,美国的 P E 公司已成功地将 ) ( Repeat , STR 或简单重复序列 Simple Sequences 人类的 TPOX 、F GA 、AM EL 等 10 个微卫星位点制 Repeat , SSR) ,主要以 1～6bp 为核心序列头尾相连 成用于人类亲子鉴定的 PCR 复合扩增商用试剂 串联重复排列而成 ,在整个基因组上都有分布 ,且有 盒[5 ] 。据报道 ,Promega 公司已将 10 个位点增加到 数量大 、分布广且均匀 、高度多态 、重组率低 、检测相 16 个位点 ,但在国内关于微卫星应用于家畜 DNA 对容易、快速 、准确等特点[ 1 ] 。因此被广泛地应用 复合扩增上的研究报道并不多 。本研究通过应用 4 于家畜标记基因图谱的构建 、DNA 指纹图的制作 、 对微卫星引物对藏山羊 DNA 进行复合扩增和同步 物种进化演变和系谱确证 、功能基因定位和数量性 扩增的比较来寻求藏山羊微卫星 DNA 复合扩增的 ( ) [2 ] 状位点 Quantit ative Trait Loci , Q TL 等方面 。 最优条件 , 以期为家畜微卫星 DNA 复合扩增的进 在诸多类型的分子遗传标记中 ,微卫星 DNA 标记 一步研究提供实验数据 。 已被国际学术界所推崇并建议加以广泛地应用[3 ] 。 1 　材料与方法 复合扩增 ,指将多对微卫