传染性法氏囊病毒蛋白VP3与靶细胞泛素-蛋白酶体通路UBC9蛋白与互作鉴定.pdf

摘 要 bursaldisease 传染性法氏囊病病毒(Infectious virus，mDV)主要侵害3．5周龄 雏鸡的体液免疫中枢器官一法氏囊的前B淋巴细胞，引起感染鸡的发病死亡和 免疫抑制，并增加了对其他病原的敏感性。目前对于宿主响应IBDV感染的分子 机制，尤其是IBDV感染后胞内泛素-蛋白酶体通路(ubiquitinproteasomepathway， UPP)的变化机制知之甚少。本研究以CEF．16细胞适应毒感染DF．1细胞为模型， 鉴定了病毒编码蛋白与UPP的共定位并分析了它们的相互作用，并从基因转录、 蛋白翻译、生物学活性等不同角度研究了IBDV感染对宿主细胞UPP的影响， 为更好地理解IBDV感染机制与宿主细胞的抗病毒策略提供了新线索。 1．IBDV编码蛋白与UPP相互作用分析制备了兔抗UPP相关蛋白El、 MHC I和MHCII的多克隆抗体，通过建立双免疫荧光标记技术，分析了IBDV 感染细胞中的5种病毒蛋白与UPP中各种重要组分的定位关系。结果显示，在 IBDV感染细胞内，泛素蛋白或泛素化的蛋白经MGl32处理后被检测到在细胞 质中呈散点状分布；IBDV的5种病毒蛋白中，只有VP3蛋