蛋氨酸脑啡肽单独或联合IL-2、IFN-γ对小鼠CD4-%27%2b-T细胞作用与研究.pdf

目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………”1 英文论著摘要……………………………………………………………………”4 二、英文缩略语………………………………………………………………………”7 三、论文 前言…………………………………………………………………………………………………………“8 日玎舌…………………………………………………………………………………………………………“ 材料与方法…………………………………………………………………………8 结果…………………………………………………………………………………………………………15 讨论…………………………………………………………………………………………………………19 结论…………………………………………………………………………………………………………21 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………22 五、参考文献…………………………………………………………………………23 六、附录 综j苤…………………………………………………………………………………………………………25 在校期间科研成绩………………………………………………………………34 致谢………………………………………………………………………………35 个人简介…………………………………………………………………………36 ·中文论著摘要· 蛋氨酸脑啡肽单独或联合IL．2、IFN一丫对 小鼠CD4+T细胞作用的研究 刖 菁 蛋氨酸脑啡肽(Methionine 前脑啡肽衍生而来，由5个氨基酸残基组成的内源性阿片肽。近年来研究表明，适 factor 宜浓度的MENK通过作用于免疫细胞上阿片受体(Opioidgrowth receptor,OGFr)，对免疫系统活性具有显著的调节作用，有人称它为新型细胞因子 或阿片生长因子(Opioid growth 脚a)等几种亚型【l】，M踟通过与这些受体的相互作用而起到免疫调节作用。 在过去的研究中，证明了MENK单独或与其它细胞因子(IFN-7或IL．2)联合应用 能增强机体免疫细胞的功能，但是对具体作用机制尚不清楚，特别是对CD4+T细 胞的作用机理，经MENK刺激后CD4+T细胞数量和活性的变化，细胞因子产生情 况，至今未见报道。 数量，CD4+T细胞阿片受体mRNA表达量以及细胞因子产生量的变化，以其来阐 明MENK对CD4+T细胞的具体免疫效应，为MENK的潜在临床应用提供理论和实 验依据。 实验材料和方法 一、实验动物 C57BL／6小鼠1 8—209，SPF级，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司。 二、实验方法 1、原代细胞培养、处理及磁珠分离纯化CD4+T细胞； 2、流式细胞术检测不同处理组CD4+T细胞数量； 3、半定量RT-PCR检测比较阿片受体小6、mnRNA表达水平； 4、ELISA法检测CD4+T细胞产生IL．2、IFN吖的水平。 结果 一、流式细胞术 体内外各实验组小鼠脾CD4+T细胞数量与对照组比，均明显增加(PO．05)， 无明显增加口O．05)。 二、半定量RT-PCR 体内外实验组小鼠脾CD4+T细胞均检测到队6、1E种阿片受体mRNA的表达， 且各处理组与对照组相比，p、6受体mRNA的表达量均明显增加(氏O．05)，lc受 明显增加p0．05)。 三、ELISA CD4+T细胞上清液中IL．2、IFN吖的产生水平：体内外各实验组与对照组比， 比几．2、IFNq量无明显增加(PO．05)。 结论 MENK单独或联合IL．2、IFN—y，在体内能显著增加小鼠CD4+T细胞数量， 与MENK单独作用时相比无明显差异。