蝙蝠葛活性成分对人白血病K562细胞株抗肿瘤作用研究的论文.pdfVIP

蝙蝠葛活性成分对人白血病K562细胞株抗肿瘤作用研究 杨万山 李香丹 姜峰玉 孙抒 延边大学医学院病理学与法医学教研部 [摘要] 目的 研究蝙蝠葛活性成分体外对人白血病K562细胞株的抑制增殖和诱导凋亡作用，并 探讨其作用机制。方法 应用MTT法检测蝙蝠葛活性成分对体外培养的人白血病K562细胞株的抑制增 殖作用的影响及细胞毒活性；通过倒置显微镜、HE染色及透射电镜对K562细胞进行形态学观察；采用 流式细胞仪检测K562细胞的周期分布相和细胞凋亡率；通过免疫细胞化学S-P法测定凋亡关键效应酶 Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3的表达情况，深入探讨蝙蝠葛活性成分对人白血病K562细胞株诱导 凋亡的机制。结果 (1)MTT比色法结果表明，蝙蝠葛活性成分对人白血病K562细胞株的增殖抑制 作用呈剂量依赖性(P＜0.01)；(2)倒置显微镜观察：蝙蝠葛活性成分20μg/ml作用后早期细胞出 现凋亡形态学变化：细胞膜鼓泡、凋亡小体形成等；作用晚期细胞发生膜破裂坏死；(3)HE染色： 蝙蝠葛活性成分20μg/ml作用细胞后出现典型凋亡形态变化凋亡小体形成、细胞核浓缩呈蓝黑色、胞 浆呈淡红色等，核染色质浓缩、呈碎块状；(4)透射电镜观察结果：蝙蝠葛活性成分20μg/ml作用 细胞后出现核染色质致密浓缩或断裂，形成大小不等的凋亡小体；(5)流式细胞仪检测结果显示： 蝙蝠葛活性成分可以诱导K562细胞发生凋亡，加药组出现亚二倍体峰，并且Go/G1期细胞比例显著增 加(P＜0.01)，而S期和G2/M期细胞比例则明显下降，将细胞阻滞在Go/G1期；(6)免疫细胞化学结果 表明：蝙蝠葛活性成分作用后加药组Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3表达增加，与对照组相比较均 有显著差异 （P＜0.01）。结论 (1)蝙蝠葛活性成分对人白血病K562细胞株具有抑制增殖和诱导 凋亡作用。(2)蝙蝠葛活性成分对K562细胞抑制增殖作用在20μg/ml作用24h之前主要以诱导凋亡 为主。(3)蝙蝠葛活性成分诱导凋亡作用机制可能与细胞周期发生G0/G1期阻滞有关；并且通过上调 Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3蛋白表达，经由细胞凋亡的死亡受体通路和线粒体通路完成凋亡的 启动和执行。 [关键词]蝙蝠葛活性成分；人白血病K562细胞株；Caspase-9蛋白；Caspase-8蛋白；Caspase-3 蛋白；细胞凋亡 生物活性多糖结构修饰研究 麻冬滨1,2 苗晶1,2 季宇彬1,2,3 1.哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心2.国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心 3.哈尔 滨商业大学药物研究所博士后科研流动站 [摘要]多糖的结构修饰能够提高或赋予多糖各种活性、降低某些多糖的毒副作用，本文主要对多